Um microbiologista usa a coloração com quitina para ver os fungos claramente ao microscópio. Os fungos usam quitina como material estrutural em suas paredes celulares, de modo que a mancha mostra bem a parede celular. A mancha azul-algodão com lactofenol é a mancha mais comum para fungos. O fenol mata os microorganismos e impede que as enzimas fúngicas quebrem a célula. A tinta azul algodão transforma a quitina em azul. A coloração com quitina é um procedimento relativamente simples com materiais baratos. Você pode fazer sua própria tinta ou comprar tinta preparada comercialmente.
Prepare uma solução de lactofenol algodão azul. Pesar 0,05 gramas de corante azul algodão usando uma balança sensível. Misture o corante com 20 mililitros de água destilada em um tubo de ensaio e deixe durante a noite.
Coloque luvas antes de terminar a preparação da mancha no dia seguinte. Coloque 20 ml de ácido láctico em um copo e misture com 20 g de cristais de fenol. Mexa até que a mistura esteja dissolvida. Adicione 40 ml de glicerol e misture. Em seguida, passe a solução de algodão azul por um pedaço de papel de filtro no copo e misture bem.
Alternativamente, use uma fonte de coloração preparada comercialmente. Armazene a mancha em temperatura ambiente.
Etiquete uma lâmina de microscópio com o nome ou número de identificação da amostra. Use um conta-gotas estéril para colocar uma única gota de uma amostra de água no centro da lâmina de microscópio. Para uma amostra seca, coloque uma única gota de solução de álcool a 70 por cento na lâmina e, em seguida, use uma alça estéril para misturar a amostra seca no álcool.
Use um conta-gotas limpo para transferir duas gotas da mancha azul de algodão com lactofenol para o centro da lâmina. Se você estiver usando álcool a 70% na lâmina, faça isso antes que o álcool evapore da lâmina.
Toque uma borda da lamínula do microscópio em uma borda da preparação de amostra úmida. Deixe a lâmina cair suavemente sobre a preparação da amostra, garantindo que não haja bolhas de ar sob a lâmina. A amostra corada está agora pronta para ser examinada ao microscópio.