寒天スラントを準備するための5つのステップ

寒天は、紅藻の精製された細胞壁に由来するゼリー状の物質です。 それは、微生物が実験室で成長する材料である微生物学的媒体に追加され、物質により多くの固体構造を提供します。 寒天には栄養価がないため、科学者が寒天を使用して微生物を培養する場合、さまざまな栄養素を加えて、ペトリ皿や試験管内の細菌の増殖を促進します。 研究者が試験管にバクテリアを保存する場合、試験管が傾いた位置にあるときに液体増殖培地が固化するため、寒天傾斜と呼ばれます。 傾斜のスクリューキャップトップは寒天が乾燥するのを防ぎます。

培地は、ペトリ皿とは異なる方法で傾斜用に調製されます。 滅菌はチューブ内の寒天で行われます。 ペトリ皿は、滅菌寒天を注ぐ前に事前に滅菌されています。 必要な水の量を測定し、三角フラスコに入れます。 ほぼ沸騰するまでストーブで加熱します。 必要に応じて他の材料を追加し、それらが溶解するまでゆっくりと絶えず混合物をかき混ぜます。 これらの成分には、培養する微生物の種類に応じて、牛肉抽出物、ペプトン、およびpH緩衝液が含まれる場合があります。

脱水寒天粉末を加える前に、固まりを防ぐために少量の冷蒸留水と混合してください。 寒天は泡立って鍋から溢れる可能性があるため、高温の液体に寒天を加えるときは注意してください。 一度に少量の寒天を加え、かき混ぜて寒天を均一に分散させます。 混合物が沸騰する前に、混合物が蒸気を発し始めたら火を止めます。

キャップのない試験管を試験管ラックに置きます。 滅菌ピペットを使用して、ポットから約5ミリリットル(約0.17オンスまたは小さじ1杯)の溶融寒天を移して、試験管を満たします。 しっかりと密封すると寒天は滅菌されないため、各試験管にゆるく蓋をしてください。 オートクレーブ内のすべてのチューブを摂氏121度または華氏250度で約25分間滅菌します。

寒天がまだ熱いときは、試験管をしっかりした表面に保持しているラックを慎重に傾けます。 厚い本、チューブ内の媒体がテストに対して傾斜した位置にあることを確認してください チューブ。 培地をこの角度で冷却して固化させ、寒天の表面積を増やします。 寒天が冷えたら、試験管のキャップを締めます。 寒天が固まったら、スラントを使用する準備が整います。 それらは、将来の使用のために、室温または冷蔵庫に保管することができます。

プレート上の単一コロニー微生物から斜面の表面に接種ループで細胞を移すことにより、斜面に接種します。 傾斜面を横切ってループを動かし、チューブのキャップを付け直します。 成長の形跡が現れるまで傾斜をインキュベートしてから、チューブを冷蔵庫に入れます。

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