エンテロバクターアエロゲネスおよび腸内細菌科の他の種は、API-20Eテストキットを使用して簡単に識別できます。 bioMeriuex Inc.によって製造されたこのキットには、テスト用の20個のミニチューブまたはウェルが含まれています。 このテストでは、純粋な細菌懸濁液をテストウェルに接種し、発生する色反応を読み取ります。 識別は、これらの呈色反応の結果を分析プロファイルインデックスと呼ばれる7桁のコードに変換することに依存しています。 このコードを製造元のデータベースと照合することで、生物の識別情報が得られます。
5mlの塩化ナトリウム0.85パーセント培地を含むアンプルを開きます。 ピペットで18〜24時間経過した分離プレートから単一のコロニーを取り除き、アンプルに追加します。 均一な懸濁液を得るために混合します。 準備ができたらすぐにこの懸濁液を使用してください。
蓋付きのトレイにハニカムウェルで構成されるインキュベーションボックスを設置します。 ボックスを開き、5mlの脱塩水または蒸留水をトレイウェルに追加します。 API 20Eテストキットに含まれているストリップを開梱し、インキュベーションボックスに入れます。
「GEL」、「VP」、「CIT」と記されたウェルのチューブとキュープルに、準備した懸濁液を入れます。 残りのウェルでは、細菌懸濁液をチューブに充填しますが、キュープルには充填しません。 「ADH」、「ODC」、「LDC」、「URE」、「H2S」のマークが付いたウェルに鉱油を加えて、嫌気性環境を作ります。
インキュベーションボックスに蓋をして、34〜38℃の温度で18〜24時間インキュベートします。
ウェルを観察し、結果シートの反応に注意してください。 少なくとも3つのテストが陽性である場合は、キットに付属の化学テスト溶液または試薬を使用して色反応に進みます。 よくマークされた「TDA」にTDA試薬を1滴加え、VP1およびVP2試薬をそれぞれよくマークされたものに1滴加えます。 「副社長」 陽性となったテストが3つ未満の場合は、これらを追加する前に、ストリップをさらに24時間インキュベートします。 試薬。
ウェルで生成された色の変化を観察します。 TDAの赤褐色は、陽性反応を示します。 キットからVP1およびVP2に試薬を追加した後、10分間待ちます。 赤またはピンクの色をポジティブと見なし、10分後に淡いピンクの色をネガティブと見なします。
キットの製造元の指定に従ってオキシダーゼテストを実行し、その結果を前の20回のテストの結果と一緒に記録します。
この7桁のプロファイル番号を、プッシュホン電話を介してキットメーカーのデータベースに入力します。 データベースによって提供されるIDを受け取るのを待ちます。 プロファイル番号で特定の結果が得られない場合は、キットの製造元が指定した補足テストを実行してください。