La gélose est une substance gélatineuse dérivée des parois cellulaires purifiées d'algues rouges. Il est ajouté aux milieux microbiologiques, qui sont des matériaux sur lesquels les micro-organismes sont cultivés en laboratoire, afin de fournir une structure plus solide à la substance. La gélose n'a aucune valeur nutritionnelle, donc lorsque les scientifiques l'utilisent pour cultiver des micro-organismes, ils ajoutent divers nutriments pour augmenter la croissance bactérienne dans les boîtes de Pétri ou les tubes à essai. Lorsque les chercheurs stockent des bactéries dans un tube à essai, on parle de gélose inclinée car le milieu de croissance liquide se solidifie lorsque le tube est en position inclinée. Un bouchon à vis sur la pente empêche la gélose de se dessécher.
Le milieu est préparé différemment pour les boîtes inclinées que les boîtes de Pétri. La stérilisation se fait avec la gélose dans les tubes; les boîtes de Pétri sont pré-stérilisées avant d'y verser de la gélose stérilisée. Mesurez la quantité d'eau nécessaire et mettez-la dans un erlenmeyer. Faites-le chauffer sur une cuisinière jusqu'à ce qu'il soit presque bouillant. Ajoutez d'autres ingrédients si nécessaire et remuez le mélange lentement et constamment jusqu'à ce qu'ils se dissolvent. Ces ingrédients peuvent inclure de l'extrait de bœuf, de la peptone et des tampons de pH, selon le type de micro-organisme cultivé.
Avant d'ajouter la poudre de gélose déshydratée, mélangez-la avec une petite quantité d'eau distillée froide pour éviter la formation de grumeaux. Soyez prudent lorsque vous ajoutez de la gélose au liquide chaud, car elle peut mousser et déborder du pot. Ajouter de petites quantités de gélose à la fois et remuer pour répartir uniformément la gélose. Éteignez le feu lorsque le mélange commence à bouillir, avant qu'il ne bout.
Placer les tubes à essai non bouchés sur un support pour tubes à essai. Remplissez les tubes à essai en transférant environ 5 millilitres - environ 0,17 once ou 1 cuillère à café - de la gélose fondue du pot à l'aide d'une pipette stérile. Bouchez sans serrer chacun des tubes à essai, car la gélose ne sera pas stérilisée si elle est bien scellée. Stérilisez tous les tubes dans un autoclave pendant environ 25 minutes à 121 degrés Celsius ou 250 degrés Fahrenheit.
Lorsque la gélose est encore chaude, inclinez délicatement le portoir en tenant les tubes à essai sur une surface solide ou un livre épais, en s'assurant que le milieu à l'intérieur des tubes est dans une position inclinée par rapport au test tuyaux. Laisser le milieu refroidir et se solidifier à cet angle, ce qui augmente la surface de la gélose. Resserrez les bouchons des tubes à essai une fois la gélose refroidie. Les pentes sont prêtes à l'emploi une fois la gélose solidifiée. Ils peuvent être conservés à température ambiante ou au réfrigérateur pour une utilisation future.
Inoculer la pente en transférant des cellules avec une boucle d'inoculation d'un micro-organisme à colonie unique sur une plaque à la surface de la pente. Déplacez la boucle sur la surface de l'inclinaison et rebouchez les tubes. Incuber la pente jusqu'à ce qu'il y ait des signes de croissance, puis mettre le tube au réfrigérateur.