Une microbiologiste utilise la coloration à la chitine pour voir clairement les champignons au microscope. Les champignons utilisent la chitine comme matériau structurel dans leurs parois cellulaires afin que la tache montre bien la paroi cellulaire. La coloration au bleu lactophénolique du coton est la coloration la plus courante pour les champignons. Le phénol tue les micro-organismes et empêche les enzymes fongiques de décomposer la cellule. Le colorant bleu coton transforme le bleu chitine. La coloration à la chitine est une procédure relativement simple avec des matériaux peu coûteux. Vous pouvez soit fabriquer votre propre teinture, soit acheter une teinture préparée dans le commerce.
Préparez une solution de bleu de coton lactophénol. Peser 0,05 gramme de colorant bleu coton à l'aide d'une balance sensible. Mélangez le colorant avec 20 millilitres d'eau distillée dans un tube à essai et laissez-le pendant la nuit.
Mettez des gants avant de terminer la préparation de la tache le lendemain. Verser 20 ml d'acide lactique dans un bécher et mélanger avec 20 g de cristaux de phénol. Remuer jusqu'à ce que le mélange soit dissous. Ajouter 40 ml de glycérol et mélanger. Filtrez ensuite la solution de bleu de coton à travers un morceau de papier filtre dans le bécher et mélangez soigneusement.
Vous pouvez également utiliser une source de teinture préparée dans le commerce. Conservez la tache à température ambiante.
Étiquetez une lame de microscope avec le nom ou le numéro d'identification de l'échantillon. Utilisez un compte-gouttes stérile pour mettre une seule goutte d'un échantillon d'eau sur le centre de la lame de microscope. Pour un échantillon sec, placez une seule goutte de solution d'alcool à 70 pour cent sur la lame, puis utilisez une boucle stérile pour mélanger l'échantillon sec dans l'alcool.
Utilisez un compte-gouttes propre pour transférer deux gouttes de la tache de bleu de coton lactophénol sur le centre de la lame. Si vous utilisez de l'alcool à 70 % sur la lame, faites-le avant que l'alcool ne s'évapore de la lame.
Touchez un bord de la lamelle du microscope à un bord de la préparation de l'échantillon humide. Laissez la lamelle tomber doucement sur la préparation de l'échantillon, en vous assurant de ne pas emprisonner de bulles d'air sous la lame. L'échantillon coloré est maintenant prêt à être examiné au microscope.
