La gélose nutritive est un type de milieu complexe à usage général utilisé principalement pour la culture d'une variété de micro-organismes.
Médias complexes microbiologie parlant, sont des milieux de croissance qui sont composés d'une gamme de nutriments disponibles et de molécules de protéines à des concentrations inconnues. La gélose nutritive est utilisée pour la culture de microbes non exigeants tels que les bactéries et les levures.
Qu'est-ce qui pousse sur la gélose nutritive?
Les micro-organismes ont besoin de nourriture, d'eau et d'un environnement approprié pour survivre et se développer. Gélose nutritive fournit ces ressources pour de nombreux types de microbes, de champignons comme la levure et la moisissure aux bactéries courantes telles que Streptocoque et Staphylocoque.
Les microbes qui peuvent être cultivés sur des milieux complexes tels que la gélose nutritive peuvent être décrits comme organismes peu exigeants. Les organismes peu exigeants sont des microbes capables de croître et de prospérer sans conditions nutritionnelles ou environnementales particulières.
Certaines bactéries ne peuvent pas être cultivées avec un milieu gélosé nutritif. Organismes exigeants (bactéries difficiles) peuvent avoir besoin d'une source de nourriture très spécifique non fournie dans la gélose nutritive. Un exemple d'organisme exigeant est Treponema pallidum, bactérie responsable de la syphilis. Les scientifiques tentent en vain de faire pousser cette bactérie dans une culture depuis plus de 100 ans.
La gélose nutritive peut être utilisée pour cultiver des micro-organismes à plusieurs fins. Une utilisation est la culture et l'entretien de colonies spécifiques d'organismes non exigeants pour une étude scientifique ou une identification. Une autre utilisation est de détecter et de quantifier la présence de substances potentiellement nocives. bactéries ou d'autres microbes dans l'eau, les eaux usées, les crustacés, la viande, les produits laitiers et d'autres produits alimentaires.
Le milieu doit être maintenu stérile afin de s'assurer que les seuls microbes en croissance sont ceux destinés à la culture, et non en croissance suite à une contamination du milieu.
Ingrédients de la gélose nutritive
Le principal ingrédients dans la gélose nutritive sont la peptone, l'extrait de bœuf et la gélose. Ces ingrédients sont réduits en poudre puis ajoutés à de l'eau distillée. La composition spécifique des nutriments gélose peut varier légèrement selon le fabricant et la source des ingrédients utilisés.
La composition du milieu gélosé nutritif préparé est de 0,5 pour cent de peptone, 0,3 pour cent d'extrait de bœuf (ou extrait de levure), 1,5 pour cent de gélose et 0,5 pour cent de chlorure de sodium.
Définir la gélose
Pour définir la gélose, pensez à un glucide complexe provenant d'algues rouges marines qui agit comme un agent solidifiant dans le milieu nutritif. Il n'a aucune valeur nutritive pour les microbes à cultiver.
La gélose gélifie à une température de 113 degrés Fahrenheit (45 degrés Celsius) et fond à 203 degrés Fahrenheit (95 degrés Celsius). La gélose comprend également des variétés de qualité alimentaire qui peuvent être utilisées comme ingrédient épaississant pour les soupes, les gelées et autres aliments.
Définition de la peptone
le définition de peptone est une protéine soluble formée aux premiers stades de la dégradation des protéines au cours du processus de digestion. Il est fabriqué en digérant partiellement des matières protéiques telles que la viande, la gélatine et la caséine à l'aide d'acides ou enzymes.
Le but de la peptone dans le milieu gélosé nutritif est de fournir la principale source d'azote organique pour la culture microbienne en croissance, et elle peut également être une source de glucides et de vitamines. La composition exacte de la peptone dans le milieu nutritif différera en fonction de la source de protéines et de la méthode de digestion.
Extrait de boeuf
le Extrait de boeuf utilisé pour fabriquer le milieu gélosé nutritif est un mélange de particules solubles dans l'eau de tissus animaux, de glucides, de composés organiques azotés, de vitamines et de sel.
L'extrait de levure peut également être utilisé pour fabriquer de la gélose nutritive et fournit des composés similaires. Le but des composés dans l'extrait de bœuf est d'aider à la croissance des bactéries cultivées sur le milieu gélosé nutritif.
Eau distillée
Eau distillée est généralement utilisé pour fabriquer le milieu gélosé nutritif. L'eau distillée est de l'eau qui a été traitée pour éliminer tous les contaminants et minéraux dissous.
L'eau distillée présente dans le milieu gélosé nutritif est nécessaire aux processus vitaux des micro-organismes qui s'y développent, tout comme l'eau est essentielle aux processus vitaux de tous les êtres vivants. L'ajout de chlorure de sodium au mélange rend l'environnement de culture similaire à cytoplasme.
Préparation du milieu gélosé nutritif
Afin de bien préparer un mélange de gélose nutritive pour la culture bactérienne, il est important de se référer aux instructions spécifiques fournies par le fabricant de nutriments. Certains ingrédients ou quantités peuvent varier légèrement selon la source de la gélose nutritive.
- Dissoudre 28 grammes de poudre de gélose nutritive dans un litre d'eau distillée.
- Chauffer le mélange à ébullition en remuant constamment. Continuez à faire bouillir et remuez le mélange pendant environ une minute ou jusqu'à ce que toute la poudre soit dissoute.
- Autoclaver le mélange dissous pendant 15 minutes à 249,8 degrés Fahrenheit (121 degrés Celsius).
- Laisser le mélange d'agar refroidir légèrement. Distribuer dans des plaques ou des tubes. Laisser solidifier.
- Replacez les couvercles et conservez dans un environnement frais, sombre et stérile tel que le réfrigérateur. Magasin plaques de gélose (boîtes de Pétri) à l'envers pour éviter la formation de condensation sur le milieu.
Le pH final du milieu gélosé nutritif préparé doit être de 6,8. Le milieu doit être de couleur ambre clair et avoir la consistance d'une gélatine ferme. Le milieu gélosé nutritif préparé doit se conserver au réfrigérateur jusqu'à deux ans, à moins qu'il n'y ait un changement marqué dans l'apparence du milieu qui indiquerait une contamination.