Los científicos e investigadores estudian el crecimiento bacteriano mediante la preparación de cultivos en un laboratorio. Las placas de Petri que contienen agar nutritivo desarrollan cultivos bacterianos a partir de una sola pasada o inoculación. Los estudiantes pueden preparar agar nutritivo en casa usando suministros de las tiendas de comestibles o de alimentos naturales para un proyecto de feria de ciencias. Los electrodomésticos de cocina convencionales y los utensilios de cocina básicos proporcionan las herramientas para preparar un medio de cultivo estéril que se puede dispensar en placas de Petri. Seguir técnicas estériles calentando los materiales y manteniendo las superficies limpias y secas mejorará los resultados al evitar que el moho y las partículas contaminen el cultivo.
Coloque un filtro de café en un colador y cuelgue el colador sobre la abertura del recipiente transparente.
Vierta lentamente el caldo en el filtro, asegurándose de que el caldo no se desborde por los lados del filtro. Si el filtro se obstruye con partículas, retire el filtro usado, reemplácelo con un filtro limpio y continúe vertiendo el caldo.
Retire el colador y el filtro de la parte superior del recipiente y observe si el caldo parece transparente (es decir, no hay partículas en suspensión en el líquido). Si hay partículas flotando en el líquido, repita los pasos 1 y 2 usando un segundo recipiente transparente y un filtro de café recién hecho.
Coloque la olla en la estufa y vierta el caldo claro en la olla.
Agregue 16 onzas de agua destilada a la olla que contiene el caldo.
Enciende la estufa y ajusta el fuego a medio-bajo. Caliente el caldo a fuego lento (es decir, aparecen pequeñas burbujas cerca del costado de la olla).
Agregue 1 cucharadita de agar-agar en polvo al caldo hirviendo a fuego lento (aproximadamente 2.5 gramos) y revuelva la mezcla hasta que el polvo se disuelva. Asegúrese de revolver el polvo para que se disuelva y evite que la gelatina se hunda al fondo de la olla (donde se puede quemar).
Repita el paso 7 hasta que todo el polvo de agar-agar se haya disuelto en el caldo.
Continúe revolviendo el caldo durante aproximadamente 1 minuto para asegurarse de que todo el polvo esté completamente disuelto.
Apaga la estufa, tapa la olla y deja que el líquido se enfríe durante al menos 15 minutos.
Organice las placas de Petri estériles en una fila para facilitar el montaje, pero no retire las tapas. Si lo desea, coloque un salvamanteles para sostener la olla caliente. Si está utilizando tazas de crema pastelera con tapa en lugar de placas de Petri, esterilice las tazas de crema pastelera colocando las tazas y las tapas invertida (boca abajo) en una bandeja para hornear cubierta con papel de aluminio y hornear en el horno durante al menos una hora a 375 grados Fahrenheit. Asegúrese de que los vasos y tapas esterilizados estén completamente fríos antes de usarlos.
Toque con cuidado el exterior de la olla para comprobar que esté caliente al tacto y coloque la olla sobre el salvamanteles. Si la olla está demasiado caliente para tocarla, espere al menos 10 minutos para dejar que se enfríe.
Retirar la tapa y reservar. Coloca el cucharón en la olla.
Retire la tapa de una placa de Petri y dispense caldo nutritivo para llenar la placa hasta la mitad. Cubra el plato inmediatamente con su tapa.
Repita el paso 14 para cada una de las placas de Petri.
Deje que el caldo de nutrientes se solidifique en las placas de Petri durante al menos 1 hora, sin molestias.
Agite suavemente las placas de Petri de lado a lado para verificar que el caldo de nutrientes se haya solidificado por completo. Si el caldo no está completamente gelificado, espere otros 20 minutos antes de revisar nuevamente.
Cubra una mesa o una superficie plana con un rollo de toallas de papel para crear un área de trabajo estéril. Arranca una hoja de papel toalla y dóblala cuatro veces para crear un taco rectangular grueso. Coloque este taco en un extremo del área de trabajo.
Transfiera una placa de Petri al área de trabajo estéril y retire la tapa. Voltee con cuidado el plato y coloque un extremo en el lado del taco doblado, de modo que quede invertido y ligeramente en ángulo (con un pequeño espacio junto al taco de toallas de papel).
Dé la vuelta a la tapa y colóquela sobre la placa de Petri en la superficie de trabajo estéril. Si aparecen gotas de agua en la tapa, sacuda suavemente esta humedad antes de colocarla sobre la superficie cubierta, pero no toque el interior de la tapa.
Repita los pasos 19 y 20 para cada placa de Petri, colocando un lado de la placa invertida en el lado de la placa anterior en lugar de la toalla de papel. Los platos aparecerán como un conjunto escalonado, con espacios en un lado para que el exceso de humedad se pueda evaporar.
Mire las placas de Petri invertidas para verificar si la humedad en los lados de las placas se evaporó. Una vez que haya desaparecido toda la humedad, gire las placas hacia arriba y cúbralas inmediatamente con las tapas para su uso.
Inocular el agar nutritivo en la placa limpiando un hisopo que contenga el cultivo deseado en la superficie del agar nutritivo antes de cubrir con la tapa. Dale la vuelta a la placa de Petri para que el sólido quede encima. Guarde la placa de Petri inoculada con el sólido en la parte superior para el cultivo y la tapa en la parte inferior para atrapar la humedad, las partículas sueltas o el crecimiento.
Cosas que necesitará
- Filtros de café
- Colador
- 2 tazones grandes y transparentes
- 16 onzas. caldo de res sin grasa
- 16 onzas. agua destilada
- Olla de cocción con tapa
- Cocina
- 10 gramos agar agar
- Cuchara medidora
- Agitador
- Rollo de toallas de papel
- Agarraderas
- Cucharón de metal
- Placas de Petri estériles o vasos de natillas transparentes con tapa
- Opcional: temporizador, salvamanteles, horno, sartén, papel de aluminio, sartén
Consejos
Si aparece humedad excesiva en las tapas, seque y esterilice las tapas en el horno a 375 grados Fahrenheit durante al menos 1 hora (asegúrese de colocar las tapas en una sartén limpia forrada con papel de aluminio antes de colocarlas en el horno).
Advertencias
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Tenga cuidado al manipular la olla caliente para evitar quemaduras. Si el costado de la olla está demasiado caliente, el líquido de la olla está muy caliente. El caldo de nutrientes debe estar tibio para dispensar en las placas, pero no demasiado caliente para producir una condensación excesiva en las placas de Petri durante el enfriamiento y fraguado.
No toque el interior de la placa de Petri (es decir, la placa o la tapa) para evitar la introducción de bacterias no deseadas en el cultivo.