Τα Enterobacter aerogenes και άλλα είδη Enterobacteriaceae είναι εύκολο να αναγνωριστούν χρησιμοποιώντας το κιτ δοκιμής API-20E. Αυτό το κιτ, που κατασκευάστηκε από την bioMeriuex Inc., περιλαμβάνει 20 μίνι σωλήνες ή πηγάδια για τη δοκιμή. Η δοκιμή συνίσταται στον εμβολιασμό ενός καθαρού βακτηριακού εναιωρήματος στα φρεάτια δοκιμής και στην ανάγνωση των αντιδράσεων χρώματος που συμβαίνουν. Η αναγνώριση βασίζεται στη μετατροπή των αποτελεσμάτων αυτών των χρωματικών αντιδράσεων σε έναν επταψήφιο κωδικό γνωστό ως Αναλυτικός δείκτης προφίλ. Η αντιστοίχιση αυτού του κωδικού με τη βάση δεδομένων του κατασκευαστή παρέχει ταυτοποίηση του οργανισμού.
Ανοίξτε μια αμπούλα που περιέχει 5 ml μέσου χλωριούχου νατρίου 0,85%. Αφαιρέστε μια μεμονωμένη αποικία από μια πλάκα απομόνωσης ηλικίας 18 έως 24 ωρών με μια πιπέτα και προσθέστε την στην αμπούλα. Ανακατέψτε για να πάρετε ένα ομοιογενές εναιώρημα. Χρησιμοποιήστε αυτήν την ανάρτηση μόλις ολοκληρώσετε την προετοιμασία της.
Δημιουργήστε ένα κουτί επώασης που αποτελείται από κυψελωτές κοιλότητες σε ένα δίσκο εφοδιασμένο με καπάκι. Ανοίξτε το κουτί και προσθέστε 5 ml απιονισμένου ή αποσταγμένου νερού στα φρεάτια του δίσκου. Αποσυσκευάστε τη λωρίδα που παρέχεται στο κιτ δοκιμής API 20E και τοποθετήστε τη στο κουτί επώασης.
Γεμίστε το σωληνάριο και το κύπελλο των φρεατίων με την ένδειξη "GEL", "VP" και "CIT" με το εναιώρημα που έχετε προετοιμάσει. Στα υπόλοιπα φρεάτια, γεμίστε το βακτηριακό εναιώρημα μέσα στο σωλήνα, αλλά όχι στον κύπελλο. Προσθέστε ορυκτέλαιο στα φρεάτια με την ένδειξη "ADH", "ODC", "LDC", "URE" και "H2S" για να δημιουργήσετε ένα αναερόβιο περιβάλλον.
Καλύψτε το κουτί επώασης με το καπάκι και επωάστε σε θερμοκρασία μεταξύ 34 και 38 βαθμών Κελσίου για 18 έως 24 ώρες.
Παρατηρήστε τα φρεάτια και σημειώστε τις αντιδράσεις στο φύλλο αποτελεσμάτων. Υπό την προϋπόθεση ότι τουλάχιστον τρεις δοκιμές είναι θετικές, προχωρήστε στις αντιδράσεις χρώματος χρησιμοποιώντας τα χημικά διαλύματα δοκιμής ή αντιδραστήρια, που συνοδεύουν το κιτ. Προσθέστε μία σταγόνα αντιδραστηρίου TDA στο καλά επισημασμένο "TDA" και ρίξτε καθένα από τα αντιδραστήρια VP1 και VP2 σε καλά επισημασμένα "VP." Εάν λιγότερες από τρεις δοκιμές βγήκαν θετικές, επωάστε τις ταινίες για άλλες 24 ώρες πριν τις προσθέσετε αντιδραστήρια.
Παρατηρήστε τις αλλαγές χρώματος που παράγονται στα φρεάτια. Ένα κοκκινωπό καφέ χρώμα στο TDA δείχνει θετική αντίδραση. Περιμένετε 10 λεπτά μετά την προσθήκη αντιδραστηρίων από το κιτ στα VP1 και VP2. Θεωρήστε ένα κόκκινο ή ροζ χρώμα ως θετικό και ένα ανοιχτό ροζ χρώμα που εμφανίζεται μετά από 10 λεπτά ως αρνητικό.
Εκτελέστε τη δοκιμή οξειδάσης όπως καθορίζεται από τον κατασκευαστή του κιτ και καταγράψτε τα αποτελέσματά της μαζί με τα αποτελέσματα των προηγούμενων 20 δοκιμών.
Εισαγάγετε αυτόν τον επταψήφιο αριθμό προφίλ στη βάση δεδομένων του κατασκευαστή του κιτ μέσω ενός τηλεφώνου με τόνους αφής. Περιμένετε να λάβετε την ταυτότητα που παρέχεται από τη βάση δεδομένων. Εάν ο αριθμός προφίλ δεν παρέχει συγκεκριμένα αποτελέσματα, πραγματοποιήστε τις συμπληρωματικές δοκιμές που καθορίζονται από τον κατασκευαστή του κιτ.