Η HPLC προσφέρει μια γρήγορη, αυτοματοποιημένη και εξαιρετικά ακριβή μέθοδο για τον προσδιορισμό ορισμένων χημικών συστατικών σε ένα δείγμα, αλλά μπορεί να είναι δαπανηρή, περίπλοκη και δεν λειτουργεί για όλα τα δείγματα. Ιατρικά, ιατροδικαστικά, περιβαλλοντικά και κατασκευαστικά εργαστήρια χρησιμοποιούν την τεχνική για τον ποσοτικό προσδιορισμό και τον διαχωρισμό των χημικών σε ένα δείγμα. Η HPLC έχει τόσο πλεονεκτήματα όσο και μειονεκτήματα σε σύγκριση με άλλες τεχνικές.
HPLC και παρόμοιες τεχνικές
Όπως και άλλες μορφές χρωματογραφίας, το HPLC επιτρέπει το διαχωρισμό των χημικών συστατικών μέσω της χρήσης μιας κινητής φάσης και μιας στάσιμης φάσης. Η κινητή φάση είναι υγρή και η στάσιμη φάση είναι στερεή. Επειδή τα διάφορα εξαρτήματα κινούνται με διαφορετικές ταχύτητες, χωρίζονται μεταξύ τους. Εναλλακτικές τεχνικές περιλαμβάνουν τριχοειδή ηλεκτροφόρηση, όπου οι ουσίες μεταναστεύουν μέσω διαλυμάτων σε ηλεκτρικό πεδίο και άλλες χρωματογραφικές μέθοδοι όπως εκχύλιση στερεάς φάσης, αέρια χρωματογραφία και λεπτή στιβάδα χρωματογραφία.
Ταχύτητα, απόδοση και ακρίβεια
Σε σύγκριση με άλλες χρωματογραφικές τεχνικές, όπως το TLC, το HPLC είναι εξαιρετικά γρήγορο και αποτελεσματικό. Χρησιμοποιεί μια αντλία, αντί για τη βαρύτητα, για να πιέσει έναν υγρό διαλύτη μέσω ενός στερεού προσροφητικού υλικού, με διαφορετικά χημικά συστατικά να διαχωρίζονται καθώς κινούνται με διαφορετικές ταχύτητες. Η διαδικασία μπορεί να ολοκληρωθεί σε περίπου 10 έως 30 λεπτά και παρέχει υψηλή ανάλυση. Είναι ακριβές και εξαιρετικά αναπαραγώγιμο. Επειδή είναι σε μεγάλο βαθμό αυτοματοποιημένο, οι βασικές δοκιμές HPLC μπορούν να εκτελεστούν με ελάχιστη εκπαίδευση.
Κόστος και πολυπλοκότητα
Παρά τα πλεονεκτήματά του, η HPLC μπορεί να είναι δαπανηρή, απαιτώντας μεγάλες ποσότητες ακριβών οργανικών. Τεχνικές όπως η εκχύλιση στερεάς φάσης και η τριχοειδής ηλεκτροφόρηση μπορεί να είναι φθηνότερες και ακόμη γρηγορότερες, ειδικά για ανάλυση υπό ορθή κατασκευαστική πρακτική. Αν και είναι σχετικά εύκολο στη χρήση υφιστάμενων μεθόδων HPLC, μπορεί να είναι περίπλοκο να αντιμετωπιστούν προβλήματα ή να αναπτυχθούν νέες μέθοδοι. Αυτό οφείλεται σε μεγάλο βαθμό στη σειρά διαφορετικών ενοτήτων, στηλών και κινητών φάσεων.
Ευαισθησία και ανάλυση
Σε γενικές γραμμές, το HPLC είναι ευέλικτο και εξαιρετικά ακριβές όσον αφορά τον προσδιορισμό και τον ποσοτικό προσδιορισμό χημικών συστατικών. Με πολλά βήματα που εμπλέκονται, η ακρίβεια του HPLC εξαρτάται σε μεγάλο βαθμό από τη διαδικασία αυτοματοποίησης και ως εκ τούτου εξαιρετικά αναπαραγώγιμη. Η HPLC έχει χαμηλή ευαισθησία για ορισμένες ενώσεις και ορισμένες δεν μπορούν να ανιχνευθούν καθώς απορροφούνται ανεπανόρθωτα. Οι πτητικές ουσίες διαχωρίζονται καλύτερα με αέρια χρωματογραφία.