มีหลายวิธีในการแยกและระบุสารประกอบต่างๆ โครมาโตกราฟี เป็นศาสตร์ที่ช่วยให้คุณสามารถแยกส่วนประกอบของส่วนผสมได้ Rฉ (บางครั้งเขียนอย่างไม่เป็นทางการว่า "ค่า rf") เป็นส่วนหนึ่งของสิ่งนั้น
โครมาโตกราฟีมีหลายประเภท จุดโฟกัสคือโครมาโตกราฟีแบบที่ง่ายที่สุด: โครมาโตกราฟีแบบกระดาษหรือโครมาโตกราฟีแบบชั้นบาง (TLC) ทั้งสองใช้ขั้นตอนทั่วไปเดียวกัน ซึ่งอธิบายไว้ด้านล่าง
โครมาโตกราฟีเกี่ยวข้องกับอะไร?
โครมาโตกราฟีทุกประเภทมี a เฟสนิ่ง และ เฟสมือถือ. เฟสที่อยู่กับที่ซึ่งคุณอาจเดาได้จากชื่อนั้นจะไม่เคลื่อนไหว ในโครมาโตกราฟีแบบกระดาษ เฟสที่อยู่กับที่คือตัวกระดาษเอง
ในการเริ่มต้นการแยกสารประกอบ สารที่จะวิเคราะห์จะถูกจุดบนขอบด้านล่างของแผ่นกระดาษ จากนั้นวางกระดาษลงในบีกเกอร์ที่มีเฟสเคลื่อนที่ซึ่งเป็นตัวทำละลาย ตัวทำละลายควรอยู่ใต้จุดที่สารสำหรับการวิเคราะห์เป็นจุด ไม่ควรแช่สารที่วิเคราะห์ลงไป
ของเหลวเคลื่อนขึ้นกระดาษโดยการกระทำของเส้นเลือดฝอย หากสารวิเคราะห์หรือส่วนหนึ่งของสารวิเคราะห์ถูกดึงดูดเข้าสู่เฟสเคลื่อนที่ มันก็จะเคลื่อนที่ไปด้วย หากมีแรงดึงดูดมากขึ้นสำหรับระยะนิ่ง มันจะไม่เคลื่อนที่
หลังจากที่ตัวทำละลายเคลื่อนขึ้นในเฟสคงที่ในระดับหนึ่งแล้ว คุณจะได้โครมาโตแกรม โครมาโตแกรมนี้บอกคุณบางอย่างเกี่ยวกับการแยกส่วนประกอบต่าง ๆ ในส่วนผสมหรือบอกคุณเกี่ยวกับสารที่คุณมี อย่างไร?
การแยกและการระบุส่วนประกอบโดยใช้โครมาโตแกรม
หากเงื่อนไขในการพัฒนาโครมาโตแกรมเหมือนกัน ระยะทางที่สารบางชนิดเคลื่อนที่ควรเปลี่ยน ระยะทางนี้วัดโดย สูตรปัจจัยการกักเก็บ หรือ Rฉ.
สูตรปัจจัยการเก็บรักษาคือ:
ค่านี้ควรเหมือนกันสำหรับสารเมื่อมีการพัฒนาโครมาโตแกรมในลักษณะเดียวกัน
สิ่งนี้มีประโยชน์เมื่อคุณมีส่วนผสมของสาร
ตัวอย่างเช่น สมมติว่าคุณมีสี่ตัวอย่าง: สามตัวอย่างคือมาตรฐาน และอีกตัวอย่างหนึ่งคือส่วนผสม งานของคุณคือการระบุว่าส่วนประกอบใดอยู่ในส่วนผสม
มาตรฐานคืออะไร? มาตรฐานเป็นตัวอย่างของสารบริสุทธิ์ สามารถเรียกใช้บนโครมาโตแกรมเพื่อเปรียบเทียบได้
สามารถเรียกใช้ส่วนผสมได้ หลังจากนั้นคุณสามารถกำหนดได้ว่าส่วนประกอบต่างๆ จะทำงานอย่างไร
Say Standard #1 มีความสัมพันธ์ที่ดีกับน้ำ (เฟสเคลื่อนที่) ซึ่งหมายความว่ามันจะเดินทางขึ้นกระดาษด้วยเฟสเคลื่อนที่ ในทางกลับกัน มาตรฐาน #2 มีความสัมพันธ์ที่ดีกับกระดาษ ซึ่งหมายความว่าจะอยู่กับระยะนิ่ง สุดท้าย Standard #3 มีผลกับทั้งน้ำและกระดาษ คุณคาดการณ์ว่าจะย้ายจำนวนกลาง
คุณพบว่าตัวทำละลายเคลื่อนที่ 5.7 ซม. ในขณะที่ Standard #1 เคลื่อนที่ 0.5 ซม. Standard #2 จะเคลื่อนที่ 4.8 ซม. และ Standard #3 จะเคลื่อนที่ 2.9 ซม. R. คืออะไรฉ ค่าแต่ละมาตรฐาน?
ตอนนี้คุณรู้จัก R. แล้วฉ ค่าสำหรับมาตรฐาน ถัดไป บนกระดาษอีกแผ่นหนึ่ง คุณวางจุดของส่วนผสมและปล่อยให้โครมาโตแกรมพัฒนาโดยการวางลงในน้ำ
เมื่อนำออกแล้ว คุณจะพบว่ามีจุดสองจุดที่แยกจากจุดเริ่มต้นที่คุณวาง นี่น่าจะหมายความว่าในส่วนผสมของคุณมีเพียงสององค์ประกอบเท่านั้น ถัดไป คุณต้องหาว่าส่วนประกอบทั้งสองนี้สอดคล้องกับมาตรฐานใด เมื่อต้องการทำเช่นนี้ คุณวัด Rฉ ค่า
ตัวทำละลายขยับ 4.5 ซม. ส่วนประกอบหนึ่ง (เรียกว่าส่วนประกอบ 1) ขยับ 2.2 ซม. และอีกชิ้นหนึ่งขยับ 3.9 ซม. (เรียกว่าส่วนประกอบ 2) หากต้องการดูว่าส่วนประกอบเหล่านี้สอดคล้องกับมาตรฐานใด คุณจะต้องใช้สูตรปัจจัยการคงอยู่เพื่อคำนวณ Rฉ ค่า
ให้ R. เหล่านี้ฉ ค่าก็มีแนวโน้มว่าองค์ประกอบ 1 จะสอดคล้องกับมาตรฐาน #3 ตั้งแต่ Rฉ ค่าจะใกล้เคียงกันมาก ส่วนประกอบ 2 น่าจะเป็นมาตรฐาน #2