กล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสงหรือแบบผสมเป็นเครื่องมือที่นักศึกษาวิชาชีววิทยาทุกคนน่าจะพบเจอ การทำความเข้าใจข้อดีของกล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสงจะช่วยให้เข้าใจถึงประโยชน์ของกล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสงสำหรับห้องเรียนหรือคลินิก เทคนิคการทดลองมากมายที่ลงตัวสำหรับใช้กับกล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสง ใช้งานง่าย และ ราคาไม่แพงเมื่อเทียบกับกล้องจุลทรรศน์ประเภทอื่นทำให้เป็นตัวเลือกที่ต้องการสำหรับวิทยาศาสตร์เพื่อชีวิตจำนวนมาก แอปพลิเคชัน
กล้องจุลทรรศน์แสงและชีววิทยาเซลล์
เนื่องจากไม่สามารถดูเซลล์ด้วยตาเปล่าได้ กล้องจุลทรรศน์จึงเป็นองค์ประกอบสำคัญในการศึกษาโครงสร้างและหน้าที่ของเซลล์ กล้องจุลทรรศน์แสงใช้แหล่งกำเนิดแสงเพื่อให้แสงสว่างแก่ชิ้นงานทดสอบในสนามที่สว่าง ตัวอย่างถูกย้อมเพื่อทำให้โครงสร้างที่ปกติโปร่งแสงหรือเกือบไม่มีสีมีสีเข้มกว่าพื้นหลังและมองเห็นได้ง่ายขึ้น เทคนิคกล้องจุลทรรศน์อีกวิธีหนึ่งคือกล้องจุลทรรศน์เรืองแสง แทนที่จะใช้คราบสีเข้มบนพื้นหลังสีอ่อน เซลล์จะถูกย้อมด้วยสีเรืองแสงและมองบนพื้นหลังสีเข้ม
พัฒนาขั้นตอนการทดลองหลายสิบขั้นตอน
การศึกษาเนื้อเยื่อด้วยกล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสงได้รับการฝึกฝนมานานกว่า 50 ปี กล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสงเป็นรูปแบบกล้องจุลทรรศน์ที่เข้าถึงได้มากที่สุดทั่วโลก และยังเป็นหนึ่งในกล้องจุลทรรศน์หลัก still เครื่องมือการฝึกอบรมสำหรับนักพยาธิวิทยาหรือแพทย์ที่วินิจฉัยโรคโดยการตรวจเนื้อเยื่อด้วยกล้องจุลทรรศน์ โครงสร้าง. ห้องปฏิบัติการหลายพันแห่งทั่วโลกได้ปรับปรุงขั้นตอนการทดลองหลายสิบขั้นตอนให้สมบูรณ์แบบ และหลายแห่งก็เปิดให้ใช้งานฟรี การรวมกันของข้อมูลทางชีววิทยาที่มีต้นทุนต่ำและข้อมูลทางชีววิทยาจำนวนมากที่กล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสงมอบให้ทำให้เป็นเครื่องมืออันล้ำค่าสำหรับการวิจัยและการแพทย์
คราบเคมีและกล้องจุลทรรศน์แสง
การสังเกตตัวอย่างภายใต้กล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสงต้องใช้คราบเคมีที่มีสีสันช่วย คราบสีน้ำเงิน แดง เขียว และน้ำตาลเหล่านี้ติดอยู่บนเนื้อเยื่อด้วยสารเคมีใสที่เรียกว่าเพอร์เมาท์ ซึ่งจะแข็งตัวเมื่อสัมผัสกับอากาศ เมื่อรวมกันแล้ว คราบเคมีเหล่านี้และเนื้อเยื่อจะคงอยู่ได้นานหลายปีโดยไม่ซีดจาง ทำให้นักวิทยาศาสตร์สามารถตรวจสอบตัวอย่างเดียวกันได้เป็นเวลานานโดยไม่สูญเสียสี การสูญเสียการมองเห็นเป็นข้อจำกัดของกล้องจุลทรรศน์เรืองแสงเนื่องจากสีย้อมเรืองแสงจะจางลงตามกาลเวลา
ซูมง่าย
ความสามารถของกล้องจุลทรรศน์แบบผสมเพื่อซูมได้ง่ายระหว่างการสังเกตหางของปลาตัวเล็ก ๆ ที่ 50 เท่าของมัน ขนาดจริงเห็นหลอดเลือดแดงที่หาง 400 เท่าของขนาดจริง เทียบกับชนิดอื่นไม่ได้ กล้องจุลทรรศน์ นักพยาธิวิทยาจะตรวจชิ้นเนื้อหรือเนื้อเยื่อชิ้นเล็ก ๆ ที่เอาเข็มออกภายใต้กล้องจุลทรรศน์แบบผสมและมักจะซูมเข้าและออกเพื่อทำการประเมินที่ดีที่สุด กล้องจุลทรรศน์แบบผสมแสงยังคงเป็นตัวเลือกที่ดีที่สุดสำหรับการวิจัยประเภทนี้
ข้อดีของกล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนต์
กล้องจุลทรรศน์เรืองแสงให้รายละเอียดภาพที่มากขึ้นสำหรับผู้ดู เนื่องจากสีย้อมเรืองแสงสามารถกำหนดเป้าหมายโครงสร้างเฉพาะภายในเซลล์ได้ โมเลกุลเรืองแสงในตัวอย่างเซลล์ที่เรียกว่าฟลูออโรฟอร์ดูดซับแสงที่ความยาวคลื่นหนึ่งและปล่อยแสงที่มีความยาวคลื่นต่างกัน สีย้อมเรืองแสงสามารถใช้กับโปรตีนและแอนติบอดีจำเพาะเพื่อเน้นโครงสร้างและแม้แต่โมเลกุลเดี่ยวภายในเซลล์ เทคนิคกล้องจุลทรรศน์เรืองแสงช่วยให้สามารถใช้สีย้อมหลายชนิดในตัวอย่างได้
ข้อเสียของกล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสง
เทคโนโลยีจุลทรรศน์ได้ระเบิดขึ้นในช่วงไม่กี่ทศวรรษที่ผ่านมา โดยกล้องจุลทรรศน์ขั้นสูงบางตัวให้ข้อมูลรายละเอียดมากกว่ากล้องจุลทรรศน์แบบผสม (แบบเบา) แบบคลาสสิก กล้องจุลทรรศน์เรืองแสงช่วยให้นักวิทยาศาสตร์สามารถมองเห็นโปรตีนสองชนิดที่แตกต่างกันในตำแหน่งเดียวกันในเซลล์โดยใช้เครื่องหมายสีแดงและสีเขียวที่ทับซ้อนกันเพื่อสร้างสีเหลือง กล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนแสดงลักษณะสามมิติของพื้นผิวเซลล์ เพื่อระบุข้อเสียอย่างหนึ่งของกล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสง กล้องจุลทรรศน์นี้ไม่มีความสามารถขั้นสูงบางอย่างของกล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนต์หรือกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอน เนื่องจากใช้เฉพาะแสงสีขาวเท่านั้น อย่างไรก็ตาม กล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนและกล้องจุลทรรศน์เรืองแสงมีราคาตั้งแต่หลายหมื่นถึง หลายแสนดอลลาร์ ในขณะที่กล้องจุลทรรศน์แบบผสมสามารถซื้อได้ในราคาเพียง $100.