Током танкослојне хроматографије, техничар поставља мрље хемијске смеше на равну плочу пресвучену слојем упијајућег материјала, а затим доњи део плоче поставља у растварач. Како се растварач креће према плочи, тако се хемикалије у смеши померају заједно са њим различитим брзинама, па се раздвајају. Овај тест одређује које су хемикалије у смеши упоређивањем брзина путовања непознатих са познатим стандардима. На резултате, међутим, могу утицати многи фактори.
ТЛ; ДР (предуго; Нисам прочитао)
На вредности фактора задржавања у танкослојној хроматографији утичу апсорбент, растварач, сама хроматографска плоча, техника наношења и температура растварача и плоче.
Фактори задржавања
Фактор задржавања хемикалије током танкослојне хроматографије је мера колико се даље помера по плочи као одговор на кретање растварача. Пошто апсолутно кретање хемикалије зависи од тога колико путује растварач, израчунавате вредности фактора задржавања у односу на степен кретања растварача. Фактор задржавања хемикалије је вертикална удаљеност коју хемикалија премешта од места на коме је била првобитно нането на плочу, подељено растојањем које је прешао растварач - мерено од истог почетка тачка.
Танкослојна хроматографска плоча
Сама танкослојна хроматографска плоча може утицати на вредност фактора задржавања добијену за одређену хемикалију. Танкослојне плоче за хроматографију могу бити пресвучене разним упијајућим чврстим материјама; најчешће силицијум диоксид или глиница. Пошто се фактор задржавања заснива на релативном афинитету хемикалије за апсорбент у поређењу са растварачем, промена апсорбента може у великој мери променити фактор задржавања. Такође, дебљина и уједначеност слоја упијајућег средства могу се разликовати од плоче до плоче, посебно ако су ручно израђени. Ови фактори такође могу променити вредност фактора задржавања за хемикалије.
Фактори задржавања утицаја растварача
Будући да растварач носи хемикалију на плочи, одређено растварало ће такође имати значајан утицај на вредност фактора задржавања хемикалије. Растварач који има јачу интеракцију са одређеном хемикалијом лакше ће га надвладати афинитет хемикалије за упијајући слој и померите је даље у датом периоду од време. Смеше растварача такође могу имати различите ефекте у зависности од удела сваког растварача.
Остали фактори
Постоји неколико других фактора који могу утицати на фактор задржавања у неким случајевима. Температура растварача и плоче може мало да се промени, јер, на пример, растварач често може боље да раствори хемикалије које превози на вишим температурама. Техника наношења узорка на плочу може такође променити фактор задржавања. Примена превише узорка може довести до тога да се велике, дифузне траке хемикалије померају по плочи, што отежава тачно мерење удаљености хемикалије која је превожена.