Када тестирате утицај пХ на активност ензима, треба да промените пХ. Међутим, то можете учинити на добре или лоше начине. Имајте на уму који додатни фактори могу да помешају ефекте променљивог пХ. У супротном, добијени резултати можда нису последица промене пХ, већ неког другог фактора. Знање како правилно варирати пХ и који фактори збуњују пХ експеримента помоћи ће вам да постигнете добре резултате и разумете зашто ваши резултати можда нису баш онакви каквима сте очекивали.
Промените само једну ствар
Приликом испитивања утицаја пХ на активност ензима, варирајте само пХ, а друге факторе одржавајте константним. Ови други фактори укључују концентрацију ензима, концентрацију супстрата и температуру. Фактори који остају константни називају се контролне променљиве. Контролне променљиве вам омогућавају да закључите да су резултати на активност ензима добијени у вашем експерименту резултат променљивости пХ, независне променљиве. Знати које факторе не треба мењати у експерименту једнако је важно као и знати који фактор треба да варира, у супротном ће бити тешко закључити да ли су резултати заправо резултат једне ствари која је била тестиран.
Изаберите једну киселину или једну базу
ПХ раствора се може променити растварањем различитих количина киселине или базе у води. Један од начина за испитивање утицаја пХ на активност ензима је постепено додавање капи јаке киселине или јаке базе у раствор који садржи ензим, а затим посматрајте тачку у којој активност ензима успорава или зауставља се. Киселина је дефинисана као једињење које донира јон водоника, названо протон (Х +), а база је дефинисано као једињење које донира хидроксидни јон (-ОХ). Различите киселине и базе морају да дају различит број протона или хидроксидних јона. Нису сви протони или хидроксидни јони одмах донирани када се у раствор дода киселина или база, али број донираних протона или хидроксидних јона мења пХ различитим брзинама. Стога је добра идеја променити пХ у експерименту са ензимима користећи само једну врсту киселине или једну врсту базе. У супротном, друге променљиве се ненамерно додају.
Ткива такође мењају пХ
Неки лабораторијски експерименти који проучавају активност ензима укључују млевење свежег ткива ради ослобађања ензима из ћелија и затим додавање супстрата за мерење активности ензима. Свеже ткиво садржи крв. Због присуства ензима у крви који мењају гас угљен-диоксида који се раствара у крви у угљену киселину, само ткиво може утицати на пХ. Тако је у експериментима који укључују активност ензима у свежем ткиву корисно испрати крв у чаши хладне воде пре млевења ткива. Ово ће минимизирати нежељену промену пХ због ткива, тако да се може проучавати сврсисходна промена пХ.
Нека величине буду исте
Као што је горе речено, концентрација ензима је контролни фактор који не треба мењати приликом испитивања утицаја пХ на активност ензима. Међутим, експериментални поступци и даље у основи варирају концентрацију ензима на суптилне начине. Ако се користи чисти раствор ензима, одржавање концентрације ензима константно. Међутим, у експериментима у којима је ензим из свежег ткива, као што су комади кромпира, комади биљака или комадићи јетре, величина комада мења количину ензима у свакој епрувети. Стога ће бити корисно да се комадићи ткива исеку што је могуће равномерније. Ово је још један пример како знање о томе шта не треба мењати и зашто је тешко не избећи промене у потпуности, помаже у тумачењу резултата промене фактора као што је пХ.