O ágar é uma substância gelatinosa derivada das paredes celulares purificadas das algas vermelhas. É adicionado aos meios microbiológicos, que são materiais nos quais os microrganismos são cultivados em laboratórios, a fim de dar à substância uma estrutura mais sólida. O ágar não tem valor nutricional, então, quando os cientistas o usam para cultivar microorganismos, eles adicionam vários nutrientes para aumentar o crescimento bacteriano em placas de Petri ou tubos de ensaio. Quando os pesquisadores armazenam bactérias em um tubo de ensaio, isso é conhecido como inclinação de ágar porque o meio líquido de crescimento se solidifica enquanto o tubo está inclinado. Uma tampa de rosca inclinada evita que o ágar seque.
O meio é preparado de maneira diferente para placas inclinadas e placas de Petri. A esterilização é feita com o ágar nos tubos; as placas de petri são pré-esterilizadas antes que o ágar esterilizado seja despejado nelas. Meça a quantidade de água necessária e coloque em um Erlenmeyer. Leve ao lume até quase ferver. Adicione outros ingredientes se necessário e mexa a mistura lenta e constantemente até que se dissolvam. Esses ingredientes podem incluir extrato de carne bovina, peptona e tampões de pH, dependendo do tipo de microrganismo sendo cultivado.
Antes de adicionar o pó de ágar desidratado, misture-o com uma pequena quantidade de água destilada fria para evitar grumos. Tenha cuidado ao adicionar ágar ao líquido quente, pois ele pode espumar e transbordar o pote. Adicione pequenas quantidades de ágar de cada vez e mexa para distribuir uniformemente o ágar. Desligue o fogo quando a mistura começar a ferver, antes de ferver.
Coloque os tubos de ensaio sem tampa em um suporte para tubos de ensaio. Encha os tubos de ensaio transferindo cerca de 5 mililitros - cerca de 0,17 onça ou 1 colher de chá - do ágar fundido do pote usando uma pipeta estéril. Tampe levemente cada um dos tubos de ensaio, porque o ágar não será esterilizado se eles forem bem fechados. Esterilize todos os tubos em uma autoclave por cerca de 25 minutos a 121 graus Celsius ou 250 graus Fahrenheit.
Quando o ágar ainda estiver quente, incline cuidadosamente a prateleira segurando os tubos de ensaio em uma superfície sólida ou livro grosso, certificando-se de que o meio dentro dos tubos está em uma posição inclinada em relação ao teste tubos. Deixe o meio esfriar e solidificar neste ângulo, o que aumenta a área de superfície do ágar. Aperte as tampas dos tubos de ensaio após o ágar esfriar. Os slants estão prontos para uso assim que o ágar solidificar. Eles podem ser armazenados em temperatura ambiente ou na geladeira para uso futuro.
Inocular a inclinação transferindo células com uma alça de inoculação de um microrganismo de uma única colônia em uma placa para a superfície da inclinação. Mova o laço pela superfície da inclinação e feche novamente os tubos. Incube o tubo inclinado até que haja evidência de crescimento e, em seguida, coloque o tubo na geladeira.