O ágar nutritivo é um tipo de meio complexo de uso geral usado principalmente para o cultivo de uma variedade de microrganismos.
Mídia complexa microbiologia falando, são meios de crescimento que são compostos de uma variedade de nutrientes disponíveis e moléculas de proteína em concentrações desconhecidas. O ágar nutriente é usado para cultivar micróbios não fastidiosos, como bactérias e leveduras.
O que cresce em ágar nutriente?
Os microrganismos precisam de comida, água e um ambiente adequado para sobreviver e crescer. Ágar nutriente fornece esses recursos para muitos tipos de micróbios, de fungos como fermento e mofo a bactérias comuns, como Estreptococo e Estafilococo.
Os micróbios que podem ser cultivados em meios complexos, como ágar nutriente, podem ser descritos como organismos não fastidiosos. Organismos não fastidiosos são micróbios que podem crescer e prosperar sem condições nutricionais ou ambientais especiais.
Algumas bactérias não podem ser cultivadas com meio nutriente de ágar.
Organismos fastidiosos (bactérias exigentes) podem precisar de uma fonte de alimento muito específica, não fornecida no ágar nutriente. Um exemplo de organismo fastidioso é Treponema pallidum, bactéria que causa a sífilis. Os cientistas vêm tentando, sem sucesso, cultivar essa bactéria em uma cultura há mais de 100 anos.O ágar nutriente pode ser usado para cultivar microrganismos para diversos fins. Uma das utilizações é o cultivo e manutenção de colônias específicas de organismos não fastidiosos para estudo científico ou identificação. Outro uso é detectar e quantificar a presença de substâncias potencialmente nocivas bactérias ou outros micróbios na água, esgoto, moluscos, carnes, laticínios e outros produtos alimentícios.
O meio deve ser mantido estéril para garantir que os únicos micróbios em crescimento são os destinados à cultura, e não crescem como resultado de contaminação do meio.
Ingredientes de Agar Nutritivo
O principal ingredientes em ágar nutriente são peptona, extrato de carne e ágar. Esses ingredientes são pulverizados e, em seguida, adicionados à água destilada. A composição específica do nutriente ágar pode variar ligeiramente dependendo do fabricante e da fonte dos ingredientes usados.
A composição do meio de ágar nutriente preparado é 0,5 por cento de peptona, 0,3 por cento de extrato de carne bovina (ou extrato de levedura), 1,5 por cento de ágar e 0,5 por cento de cloreto de sódio.
Para definir ágar
Para definir o ágar, pense em um carboidrato complexo proveniente de algas vermelhas marinhas que atua como um agente solidificador no meio nutriente. Não tem valor nutricional para os micróbios a serem cultivados.
O ágar géis a uma temperatura de 113 graus Fahrenheit (45 graus Celsius) e derrete a 203 graus Fahrenheit (95 graus Celsius). O ágar também inclui variedades de qualidade alimentar que podem ser usadas como ingrediente espessante para sopas, geléias e outros alimentos.
Definição de peptona
O definição de peptona é uma proteína solúvel formada nos estágios iniciais da quebra de proteínas durante o processo de digestão. É feito através da digestão parcial de materiais proteicos, como carne, gelatina e caseína, usando ácidos ou enzimas.
O propósito da peptona no meio nutriente de ágar é fornecer a fonte primária de nitrogênio orgânico para a cultura microbiana em crescimento, e também pode ser uma fonte de carboidratos e vitaminas. A composição exata da peptona no meio nutriente será diferente dependendo da fonte de proteína e do método de digestão.
Extrato de Carne
O extrato de carne usado para fazer o meio de ágar nutriente é uma mistura de partículas solúveis em água de tecido animal, carboidratos, compostos orgânicos de nitrogênio, vitaminas e sal.
O extrato de levedura também pode ser usado para fazer ágar nutriente e fornece compostos semelhantes. O objetivo dos compostos no extrato de carne bovina é auxiliar no crescimento das bactérias que estão sendo cultivadas no meio nutriente de ágar.
Água destilada
Água destilada é normalmente usado para fazer o meio de ágar nutriente. Água destilada é a água que foi processada para remover quaisquer contaminantes e minerais dissolvidos.
A água destilada presente no meio nutriente de ágar é necessária para os processos vitais dos microrganismos que ali crescem, assim como a água é essencial para os processos vitais de todos os seres vivos. A adição de cloreto de sódio à mistura torna o ambiente de cultura semelhante a citoplasma.
Preparando o Meio Ágar Nutriente
A fim de propriamente preparar uma mistura de nutrientes ágar para cultura bacteriana, é importante consultar as instruções específicas fornecidas pelo fabricante do nutriente. Alguns ingredientes ou quantidades podem variar ligeiramente dependendo da fonte do ágar nutriente.
- Dissolva 28 gramas do pó de ágar nutriente em um litro de água destilada.
- Aqueça a mistura até ferver, mexendo sempre. Continue a ferver e mexa a mistura por cerca de um minuto ou até que todo o pó esteja dissolvido.
- Autoclave a mistura dissolvida por 15 minutos a 249,8 graus Fahrenheit (121 graus Celsius).
- Deixe a mistura de ágar esfriar ligeiramente. Dispense em placas ou tubos. Deixe para solidificar.
- Recoloque as tampas e guarde em um ambiente fresco, escuro e estéril, como a geladeira. Loja placas de ágar (Placas de Petri) de cabeça para baixo para evitar a formação de condensação no meio.
O pH final do meio de ágar nutriente preparado deve ser 6,8. O meio deve ser de cor âmbar claro e ter consistência de gelatina firme. O meio de ágar nutritivo preparado deve permanecer na geladeira por até dois anos, a menos que haja uma mudança marcante na aparência do meio que indique contaminação.