O ágar nutritivo é um tipo de meio complexo de uso geral usado principalmente para o cultivo de uma variedade de microrganismos.
Mídia complexa microbiologia falando, são meios de crescimento que são compostos de uma variedade de nutrientes disponíveis e moléculas de proteína em concentrações desconhecidas. O ágar nutriente é usado para cultivar micróbios não fastidiosos, como bactérias e leveduras.
O que cresce em ágar nutriente?
Os microrganismos precisam de comida, água e um ambiente adequado para sobreviver e crescer. Ágar nutriente fornece esses recursos para muitos tipos de micróbios, de fungos como fermento e mofo a bactérias comuns, como Estreptococo e Estafilococo.
Os micróbios que podem ser cultivados em meios complexos, como ágar nutriente, podem ser descritos como organismos não fastidiosos. Organismos não fastidiosos são micróbios que podem crescer e prosperar sem condições nutricionais ou ambientais especiais.
Algumas bactérias não podem ser cultivadas com meio nutriente de ágar.
O ágar nutriente pode ser usado para cultivar microrganismos para diversos fins. Uma das utilizações é o cultivo e manutenção de colônias específicas de organismos não fastidiosos para estudo científico ou identificação. Outro uso é detectar e quantificar a presença de substâncias potencialmente nocivas bactérias ou outros micróbios na água, esgoto, moluscos, carnes, laticínios e outros produtos alimentícios.
O meio deve ser mantido estéril para garantir que os únicos micróbios em crescimento são os destinados à cultura, e não crescem como resultado de contaminação do meio.
Ingredientes de Agar Nutritivo
O principal ingredientes em ágar nutriente são peptona, extrato de carne e ágar. Esses ingredientes são pulverizados e, em seguida, adicionados à água destilada. A composição específica do nutriente ágar pode variar ligeiramente dependendo do fabricante e da fonte dos ingredientes usados.
A composição do meio de ágar nutriente preparado é 0,5 por cento de peptona, 0,3 por cento de extrato de carne bovina (ou extrato de levedura), 1,5 por cento de ágar e 0,5 por cento de cloreto de sódio.
Para definir ágar
Para definir o ágar, pense em um carboidrato complexo proveniente de algas vermelhas marinhas que atua como um agente solidificador no meio nutriente. Não tem valor nutricional para os micróbios a serem cultivados.
O ágar géis a uma temperatura de 113 graus Fahrenheit (45 graus Celsius) e derrete a 203 graus Fahrenheit (95 graus Celsius). O ágar também inclui variedades de qualidade alimentar que podem ser usadas como ingrediente espessante para sopas, geléias e outros alimentos.
Definição de peptona
O definição de peptona é uma proteína solúvel formada nos estágios iniciais da quebra de proteínas durante o processo de digestão. É feito através da digestão parcial de materiais proteicos, como carne, gelatina e caseína, usando ácidos ou enzimas.
O propósito da peptona no meio nutriente de ágar é fornecer a fonte primária de nitrogênio orgânico para a cultura microbiana em crescimento, e também pode ser uma fonte de carboidratos e vitaminas. A composição exata da peptona no meio nutriente será diferente dependendo da fonte de proteína e do método de digestão.
Extrato de Carne
O extrato de carne usado para fazer o meio de ágar nutriente é uma mistura de partículas solúveis em água de tecido animal, carboidratos, compostos orgânicos de nitrogênio, vitaminas e sal.
O extrato de levedura também pode ser usado para fazer ágar nutriente e fornece compostos semelhantes. O objetivo dos compostos no extrato de carne bovina é auxiliar no crescimento das bactérias que estão sendo cultivadas no meio nutriente de ágar.
Água destilada
Água destilada é normalmente usado para fazer o meio de ágar nutriente. Água destilada é a água que foi processada para remover quaisquer contaminantes e minerais dissolvidos.
A água destilada presente no meio nutriente de ágar é necessária para os processos vitais dos microrganismos que ali crescem, assim como a água é essencial para os processos vitais de todos os seres vivos. A adição de cloreto de sódio à mistura torna o ambiente de cultura semelhante a citoplasma.
Preparando o Meio Ágar Nutriente
A fim de propriamente preparar uma mistura de nutrientes ágar para cultura bacteriana, é importante consultar as instruções específicas fornecidas pelo fabricante do nutriente. Alguns ingredientes ou quantidades podem variar ligeiramente dependendo da fonte do ágar nutriente.
- Dissolva 28 gramas do pó de ágar nutriente em um litro de água destilada.
- Aqueça a mistura até ferver, mexendo sempre. Continue a ferver e mexa a mistura por cerca de um minuto ou até que todo o pó esteja dissolvido.
- Autoclave a mistura dissolvida por 15 minutos a 249,8 graus Fahrenheit (121 graus Celsius).
- Deixe a mistura de ágar esfriar ligeiramente. Dispense em placas ou tubos. Deixe para solidificar.
- Recoloque as tampas e guarde em um ambiente fresco, escuro e estéril, como a geladeira. Loja placas de ágar (Placas de Petri) de cabeça para baixo para evitar a formação de condensação no meio.
O pH final do meio de ágar nutriente preparado deve ser 6,8. O meio deve ser de cor âmbar claro e ter consistência de gelatina firme. O meio de ágar nutritivo preparado deve permanecer na geladeira por até dois anos, a menos que haja uma mudança marcante na aparência do meio que indique contaminação.