Mikrobiologia to nauka o organizmach zbyt małych, by można je było zobaczyć gołym okiem. Ich mały rozmiar oznacza, że nie możesz iść do zoo ani wybrać się na safari, aby zbadać te stworzenia; musisz sam je wychować. Subkultura to jedna z technik mikrobiologicznych, która pozwala na prawidłowe ich hodowanie poprzez przenoszenie niektórych drobnoustrojów z jednego środowiska do drugiego.
Hodowla mikroorganizmów
Mikroorganizmy są jak każdy inny organizm. Jedzą, oddychają, rozmnażają się, wydalają. Jeśli chcesz hodować mikroorganizmy, musisz zapewnić środowisko, w którym mogą wykonywać wszystkie te czynności. W przeciwieństwie do zapewniania kotu środowiska, „dom” i „pokarm” dla twoich mikroorganizmów to to samo – pożywka wzrostowa.
Niektóre podłoża wzrostowe są płynne, inne są półstałym żelem. Pożywki płynne nazywane są bulionami, a pożywki żelowe nazywane są agarami. Specyficzny skład bulionów i agarów można dostosować tak, aby wspierać ogólny wzrost drobnoustrojów lub optymalizować wzrost konkretnego organizmu.
Świeże media
Mikroorganizmy jedzą i wydalają w tej samej pożywce wzrostowej. Tak więc drobnoustroje mogą sprawić, że ich własne środowisko będzie mniej odpowiednie do wspierania ich wzrostu. To jeden z powodów, dla których warto przeprowadzić subkulturę: przenieść kilka drobnoustrojów ze starego, częściowo skażonego podłoża na nowe, świeże podłoże z dużą ilością pożywienia i bez odpadów. Ten rodzaj subkultury polega po prostu na utrzymaniu zdrowej linii komórkowej. Usuwasz bardzo mały procent – podpróbkę – istniejącej populacji komórek i umieszczasz je w nowej pożywce, gdzie mogą się rozwijać i rozmnażać.
Subkultura do identyfikacji
Wiele próbek ze świata rzeczywistego zawiera kilka rodzajów mikroorganizmów. Aby właściwie zidentyfikować organizmy w próbce, musisz wyizolować różne typy. Wyobraź sobie na przykład, że masz bulion z kilkoma rodzajami organizmów. Próbujesz bulion za pomocą narzędzia, takiego jak cienki metalowy pierścień zwany ezą do zaszczepiania. Następnie przenosisz pobrane drobnoustroje na pożywkę agarową. To pierwszy krok w tym procesie subkultury. Stosując określoną technikę, możesz rozprowadzać mikroorganizmy cienko w miarę przesuwania się po płytce. Najlepiej byłoby, gdyby drobnoustroje rozprzestrzeniały się tak cienko, że tworzyły maleńkie, wyraźne kolonie na płytce agarowej – każda z nich pochodzi od jednego mikroorganizmu.
Korzystanie z subkultur
Jeśli wytworzyłeś płytkę agarową z wyraźnymi, możliwymi do zidentyfikowania koloniami, możesz je ponownie przesiać – tym razem pobierając próbki drobnoustrojów tylko z jednej kolonii. Jeśli na przykład przeniesiesz tę subkulturę do podłoża bulionowego, otrzymasz bulion zawierający tylko jeden rodzaj drobnoustrojów. Mógłbyś wtedy wyhodować wystarczająco dużo tego konkretnego organizmu, aby mieć populację, na której mógłbyś przeprowadzić testy. Jeśli będziesz hodować każdą odrębną kolonię drobnoustrojów, uzyskasz wyizolowane populacje każdy rodzaj organizmu obecnego w początkowej próbce i masz możliwość ich badania w Szczegół.
