Forskere og teknikere trenger ofte å beregne konsentrasjonen av celler i en suspensjon. For eksempel, når en pasient får blodet trukket ut på et legekontor, kan laboratoriet bruke visse metoder for å lete etter mengden hvite blodlegemer i et gitt volum blod. Dette gir legen mye informasjon om helsen til pasienten hennes, spesielt immunforsvaret hans og om han bekjemper en infeksjon eller en annen sykdom. Tester som dette kan se etter mange andre celler i blod så vel som ryggmargsvæske og andre kroppsvæsker, slik som sædcelleantal i sæd for fruktbarhetsformål. Forskere beregner også cellekonsentrasjoner av bakterier, gjær og andre mikroorganismer for mange formål, alt fra økologisk forskning til industriell teknologi. En av de vanligste teknikkene blir også undervist i mange høyskolebiologiklasser, og den bruker en enhet som kalles tellekammer.
Før cellesuspensjonen kan gå inn i tellekammeret, kan det trenge fortynning fordi den kan inneholde tusenvis eller millioner av celler. I så fall kan ikke cellene med rimelighet telles. For å fortynne prøven, bruk en steril pipette for å plassere ti mikroliter av celleoppløsningen i et prøverør som inneholder 90 mikroliter av et fortynningsmiddel. Typen av fortynningsmiddel vil avhenge av celletypen. Bland det godt. Denne løsningen er nå ti ganger mer fortynnet enn den opprinnelige prøven, så fortynningsfaktoren er 10
Det kan hende du må prøve flere fortynninger for å bestemme riktig fortynningsfaktor for tellekammeret. Et tellekammer er i utgangspunktet en veldig liten, klar, rektangulær eske med presis dybde og et presist rutenett innskrevet over toppen. Det er også kjent som et hemocytometer, eller noen ganger et hemacytometer. Målet er at suspensjonen skal fortynnes nok til at ingen celler overlapper hverandre når de blir sett på i tellekammeret, og de fordeles over hele rutenettet på en jevn måte. Pipetter den fortynnede suspensjonen som inneholder cellene inn i brønnen i tellekammeret, der den vil slå seg ned i gitterkammeret gjennom kapillærvirkning. Plasser tellekammeret på mikroskop-scenen og se det under lav effekt.
Rutenettet inneholder firkanter som er laget av enda mindre firkanter. Velg omtrent fire eller fem firkanter, eller hvor mange du trenger for å telle minst 100 celler, i et mønster du velger, for eksempel de fire hjørnene og et midtrom. Hvis cellene er store, kan dette være de store rutene, men hvis cellene er små, kan du velge de mindre rutene i stedet.
Det spesifikke volumet til hvert rutenett kan variere fra produsent av tellekammer, men ofte er kammerets dybde 0,1 millimeter, er arealet til de store rutene 1 kvadrat millimeter, og arealet til de mindre rutene er 0,04 kvadrat millimeter. De større rutene har da et volum på 0,1 kubikk millimeter. Anta for dette eksemplet at du tellet totalt 103 celler i fem firkanter, og at du fortynnet den første prøven til fortynningsfaktoren var 10-2.
Hvis hvert rutenett har et volum på 0,1 kubikkmillimeter og fem ble talt, var det totale volumet til kammeret som ble talt opp 0,5 kubikkmillimeter, og det var 103 celler. Dobbelt for å gjøre det 1 kubikk millimeter ville gjøre det til 206 celler. En kubikkcentimeter tilsvarer 1 milliliter, noe som er en nyttig måling for væsker. Det er 1000 kubikkmillimeter i en kubikkcentimeter. Derfor, hvis det hadde vært en kubikkcentimeter eller en milliliter suspensjon, ville du ha telt 206 000 (206 x 1000) celler. Slik ser det ut som en ligning:
Volum av rutenett kvadrat × antall kvadrater telt = totalvolum av tellet oppheng
Antall celler ÷ volum av tellet suspensjon = celletall per millimeter kubert
Celletall per millimeter kubert × 1000 = celletall per milliliter
Du må redegjøre for fortynning som utføres for å gjøre den opprinnelige løsningen tellbar under mikroskopet. I dette eksemplet er fortynningsfaktoren 10-2. Slik beregner du den opprinnelige konsentrasjonen av løsningen:
Celleantall per milliliter ÷ fortynningsfaktor = Cellekonsentrasjon
For dette eksemplet er celletallet per milliliter 206 000, og deler det med 10-2 (0,01) gir en cellekonsentrasjon på 20.600.000 celler per milliliter i den første prøven.