Teknikk for å skille bakterier i en blandet kultur

Mikrobiologer, genetikere og molekylærbiologer bruker bakteriekulturer for å oppdage livets hemmeligheter. Mikrobiologer studerer bakterier for å oppdage nye antibiotika for behandling av infeksjoner. Genetikere bruker bakterier for å avgjøre om kjemikalier kan ha kreftfremkallende egenskaper. Molekylærbiologer studerer de biokjemiske banene til cellulære prosesser for å forstå funksjonene til enzymer vi har til felles med bakterier. Så varierte som studiene er, isolerer alle tre vitenskapene bakteriekulturer ved hjelp av samme teknikk: agarplattestriping.

Grunnleggende om mikrober

Mange bakterier har særegne former som hjelper til med klassifisering.

•••Chad Baker / Photodisc / Getty Images

Mikrober er encellede organismer som bakterier og sopp. Disse organismene reproduserer raskt og er enkle å dyrke, noe som gjør dem spesielt nyttige å studere. Når en potensielt ny mikrobe oppdages i naturen, plasseres en prøve i et vekstmedium som kalles en "buljong". Buljonger består av sterilisert vann, salter, sukker og andre næringsstoffer som vil fremme rask bakterievekst i en kolbe under inkubasjon. Imidlertid vil buljongen oftere enn ikke inneholde mer enn en type bakterier. For å isolere en enkelt bakterie, vil forskeren spre en liten prøve av buljongen over en halvfast agarplate ved hjelp av en mikrobiell teknikk som kalles "striper".

Agar Plates

Bruk av hansker når du håndterer agarplater, forhindrer at bakterier fra hendene forurenser prøven.

•••Comstock / Comstock / Getty Images

Agarplater er halvtransparente, halvfaste geler som består av tang og spesifikke konsentrasjoner av næringsstoffer. Nytten av agar ligger i at den gir en jevn, myk overflate for voksende bakterier. Når en forsker plasserer en enkelt bakterie på agar, vil den reprodusere seg ved å doble seg selv tusenvis av tid og vil fremstå som en liten koloni av enkeltceller.

Bakterier som strekker verktøy

De grunnleggende verktøyene for å strekke bakteriekolonier har ikke endret seg siden oppdagelsen av teknikken.

•••Photos.com/Photos.com/Getty Images

Bakteriestreking krever tre verktøy: en agarplate, en alkoholbrenner og en trådsløyfe. Agarplaten er vekstmediet som bakteriene overføres til etter å ha vokst i buljong. Alkoholbrenneren er en liten, alkoholfylt lampe for sterilisering av trådsløyfen - et langt, slankt håndtak med en liten sløyfe av brannsikker ledning festet i den ene enden. Sløyfen holder en liten dråpe bakteriefylt buljong når bakteriene overføres fra buljongen til agarplaten.

Bakterier striper prosess

En sikksakkbevegelse er den mest effektive måten å spre bakterier over en agarplate.

•••Hemera Technologies / Photos.com / Getty Images

Det er enkelt å strekke bakterier over en agarplate, men du må utføre dette trinnet riktig, ellers vil du ikke isolere separate kolonier. Varm løkken over alkoholbrenneren for å sterilisere ledningen, og dypp deretter spissen av løkken i buljongen. Strek løpespissen frem og tilbake flere ganger over en fjerdedel av agarplaten. Steriliser løkken igjen, og stri over og vinkelrett på de første stripene. Flytt løkken frem og tilbake noen ganger over en ny del av platen. Steriliser spissen. strek lett over den siste stripete delen en gang og beveg løkken frem og tilbake flere ganger. Strekingen er å fortynne den første dråpen av buljong til et punkt der de siste stripene vil inneholde enkeltkolonier. Plasser platen i en inkubator eller på en bordplate ved romtemperatur, og vent til koloniene vokser over natten. Enkeltkolonier i den siste streken vil bli isolerte kolonier av en enkelt bakterie.

  • Dele
instagram viewer