Bufferløsninger motstår endringer i pH fordi de inneholder svake syrebasekonjugater som nøytraliserer H + og OH-ioner. Bufferløsninger består av svake syrer eller baser og saltet av den syren eller basen. Valg av et passende buffersystem avhenger av pH-området for buffring. De fleste biologiske reaksjoner forekommer ved et pH-område på 6 til 8. Fosfatbuffere buffer over pH-området 6,5 til 7,5. Karboksylsyrebuffere er nyttige fra pH 3 til 6. Boratbuffere fungerer fra pH 8,5 til 10. Aminosyrebuffere som glycin og histidin utfører over et mangfold av pH-områder. Tris buffer er et av de mest brukte buffersystemene i biologilaboratorier. Beregninger for en Tris-bufferløsning vil bli brukt i følgende eksempel, men metoden gjelder for enhver bufferløsning.
Bruk produktet av den endelige løsningen molaritet og volum for å bestemme mol basen som kreves. For eksempel, hvis det er behov for 2 liter av en 0,1 M løsning av Tris-buffer, er antall mol Tris som kreves:
Beregn massen av buffer som kreves ved å multiplisere antall mol som trengs av molekylvekten til basen. For eksempel er massen på 0,2 mol Tris-base lik:
Løs opp basen i destillert vann ved hjelp av en magnetisk omrøringsstang og omrøringsplate. Oppløs det i et volum vann bare litt mindre enn det endelige oppløsningsvolumet (950 til 975 ml for hver liter sluttoppløsning). PH-verdien til Tris-buffer endres med konsentrasjon og trenger omjustering hvis det brukes for lite initialvolum. Det er også best å klargjøre bufferen ved samme temperatur som den vil bli brukt under analysen eller eksperimentet, da Tris har store temperaturavhengige endringer i pH.
Tips
- For å spare tid når du lager en bufferløsning, kan du bruke forhåndsbaserte bufferkonsentrater ved ønsket pH og fortynne for ønsket molaritet og volum. Forbered bufferløsning ved samme temperatur som den vil bli brukt for å unngå betydelige pH-endringer. Unngå tidkrevende pH-justeringer, titrer bare etter fortynning til ønsket konsentrasjon. Oppløsning i for lite volum vil føre til gjentatte titreringer.
Advarsler
- Vær forsiktig når du håndterer syrer og baser. Bruk vernebriller.
om forfatteren
Carla Boulianne er en evolusjonær biolog ved opplæring og frilansskribent av lidenskap. I tillegg til å skrive for Demand Studios og eHow, er hun funksjonsforfatter for Foreldre til et begavet barn på Suite101.com. Hun gleder seg over å utforske nye temaer gjennom omfattende forskning.
Fotokreditter
Foto med tillatelse til Emmi P. @ morgueFile.com