Hestefluer forveksles ofte med hjortfluer fordi de ser nesten like ut og går gjennom larvestadiet i omtrent samme slags miljø. Imidlertid, foruten å ha unike egenskaper som mørkere vinger, spiser hestefluer også andre pattedyr foruten hjort, inkludert mennesker. Den kvinnelige hesteflyen er den som suger blod fra pattedyr, da hannfluer ikke har store fremspring på munnen med de samme knivskarpe tennene kvinner bruker for å rive inn i huden til ofrene. En hestefly må ha minst ett blodmåltid før hun er i stand til å reprodusere, og larvestadiet kan ta opptil tre år.
Egg
Kvinnelige hestefluer legger fra 25 til 1000 egg. Et så stort antall kan kreve mye plass, men hesteflyen løser dette romproblemet ved å legge eggene i nivåer. Hesteflueegg er en mørk farge og har en spindelform. Eggene legges på planter som henger ut vann, og de klekker på fem til 12 dager.
Larver
Hesteflue-larvestadiet finner sted i gjørme eller lignende våtmark, akkurat som hjortflyen gjør. Larvestadiet kan vare fra ett til tre år. Larvene faller fra eggene i gjørma eller vann og graver seg ned i jorden. Larvene kan også falle i vannet og deretter føres til tørt land. Hesteflylarven lever av organisk rusk, insekter og meitemark, så vel som andre hesteflylarver. Larvene modnes om våren og går inn i puppestadiet.
Pupa
Puppestadiet for en voksende hestefly finner vanligvis sted på tørr jord. Valpescenen kalles også kokongstadiet. Avhengig av miljø og art, kan dette stadiet vare fra seks til 12 dager.
Voksen
Den voksne hesteflyen kommer ut av puppene når puppestadiet er fullført. Denne fasen oppstår vanligvis på sensommeren. Voksne hestefluer er sterke flyger og vil umiddelbart oppsøke mat så vel som en kompis. Mens hunner søker etter et blodmåltid, vil hannene mate av nektar og plante juice.