Tijdens dunnelaagchromatografie plaatst een technicus vlekken van een chemisch mengsel op een vlakke plaat die is bedekt met een laag absorberend materiaal, waarna het onderste deel van de plaat in oplosmiddel wordt geplaatst. Terwijl het oplosmiddel op de plaat omhoog beweegt, gaan de chemicaliën in het mengsel met verschillende snelheden mee omhoog, zodat ze scheiden. Deze test bepaalt welke chemicaliën in een mengsel zitten door de verplaatsingssnelheden van onbekenden te vergelijken met bekende normen. De resultaten kunnen echter door veel factoren worden beïnvloed.
TL; DR (te lang; niet gelezen)
Retentiefactorwaarden bij dunnelaagchromatografie worden beïnvloed door het absorptiemiddel, het oplosmiddel, de chromatografieplaat zelf, de applicatietechniek en de temperatuur van het oplosmiddel en de plaat.
Retentiefactoren
De retentiefactor voor een chemische stof tijdens dunnelaagchromatografie is een maat voor hoe ver deze op de plaat beweegt als reactie op de beweging van het oplosmiddel. Aangezien de absolute beweging van de chemische stof afhangt van de afstand die het oplosmiddel aflegt, berekent u de retentiefactorwaarden in verhouding tot de mate van beweging van het oplosmiddel. De retentiefactor voor een chemische stof is de verticale afstand die de chemische stof aflegt vanaf de plek waar deze zich bevond oorspronkelijk op de plaat aangebracht, gedeeld door de door het oplosmiddel afgelegde afstand - gemeten vanaf hetzelfde begin punt.
Dunne laag chromatografie plaat
De dunnelaagchromatografieplaat zelf kan de retentiefactorwaarde die voor een bepaalde chemische stof wordt verkregen, beïnvloeden. Dunnelaagchromatografieplaten kunnen worden gecoat met een verscheidenheid aan absorberende vaste stoffen; meestal silica of aluminiumoxide. Aangezien de retentiefactor gebaseerd is op de relatieve affiniteit van de chemische stof voor het absorptiemiddel in vergelijking met het oplosmiddel, kan het veranderen van het absorptiemiddel de retentiefactor sterk veranderen. Ook kunnen de dikte en uniformiteit van de absorberende laag van plaat tot plaat variëren, vooral als ze met de hand zijn gemaakt. Deze factoren kunnen ook de retentiefactorwaarde voor chemicaliën veranderen.
Oplosmiddeleffecten Retentiefactoren
Aangezien het oplosmiddel de chemische stof op de plaat draagt, zal het specifieke gebruikte oplosmiddel ook een aanzienlijke invloed hebben op de retentiefactorwaarde voor de chemische stof. Een oplosmiddel dat een sterkere interactie heeft met een bepaalde chemische stof, zal gemakkelijker elke affiniteit van de chemische stof voor de absorberende laag, en verplaats die chemische stof verder in een bepaalde periode van tijd. Mengsels van oplosmiddelen kunnen ook verschillende effecten hebben, afhankelijk van de hoeveelheid van elk oplosmiddel.
Andere factoren
Er zijn een paar andere factoren die in sommige gevallen de retentiefactor kunnen beïnvloeden. De temperatuur van het oplosmiddel en de plaat kunnen kleine veranderingen veroorzaken, omdat het oplosmiddel bijvoorbeeld de chemicaliën die het vervoert bij hogere temperaturen vaak beter kan oplossen. De techniek van de technicus bij het aanbrengen van het monster op de plaat kan ook de retentiefactor veranderen. Het aanbrengen van te veel monster kan ertoe leiden dat grote, diffuse banden van chemicaliën op de plaat bewegen, waardoor het moeilijk wordt om de afstand die de chemische stof is getransporteerd nauwkeurig te meten.