科学者や技術者は、懸濁液中の細胞の濃度を計算する必要があることがよくあります。 たとえば、患者が診療所で採血されると、検査室は特定の方法を使用して、特定の量の血液中の白血球の量を探すことができます。 これにより、医師は患者の健康状態、特に免疫系や、感染症と闘っているのか別の病気と闘っているのかについて多くの情報を得ることができます。 このような検査では、血液中の他の多くの細胞だけでなく、精液中の精子細胞数など、脊髄液や他の体液を探すことができます。 科学者はまた、生態学的研究から産業技術に至るまで、さまざまな目的で細菌、酵母、その他の微生物の細胞濃度を計算します。 最も一般的な手法の1つは、多くの大学の生物学のクラスでも教えられており、カウントチャンバーと呼ばれるデバイスを使用しています。
細胞懸濁液がカウントチャンバーに入る前に、数千または数百万の細胞が含まれている可能性があるため、希釈が必要になる場合があります。 その場合、細胞を合理的に数えることはできません。 サンプルを希釈するには、滅菌ピペットを使用して、90マイクロリットルの希釈剤を含む試験管に10マイクロリットルの細胞溶液を入れます。 希釈剤の種類は、細胞の種類によって異なります。 よく混ぜます。 この溶液は現在、最初のサンプルの10倍に希釈されているため、希釈係数は10です。-1. ラベルを付けます。 溶液が十分に希釈されるまで、毎回滅菌ピペットを使用して、これを数回繰り返します。 2回目の希釈では、2番目の試験管は最初の溶液の100倍に希釈されたため、希釈係数は10でした。-2 等々。
カウントチャンバーの適切な希釈係数を決定するために、いくつかの希釈を試す必要がある場合があります。 カウントチャンバーは基本的に非常に小さく、透明な長方形の箱で、正確な深さと上部に刻まれた正確なグリッドがあります。 血球計算盤、または血球計算盤としても知られています。 目的は、懸濁液を十分に希釈して、カウントチャンバーで見たときに細胞が重ならないようにし、細胞がグリッド全体に均一に分布するようにすることです。 細胞を含む希釈懸濁液をカウントチャンバーのウェルにピペットで入れ、毛細管現象によってグリッドチャンバーに沈殿させます。 カウントチャンバーを顕微鏡ステージに置き、低電力で観察します。
グリッドには、さらに小さな正方形でできている正方形が含まれています。 四隅や中央の正方形など、選択したパターンで、約4つまたは5つの正方形、または少なくとも100個のセルを数える必要がある正方形を選択します。 セルが大きい場合、これらは大きな正方形である可能性がありますが、セルが小さい場合は、代わりに小さい正方形を選択することもできます。
各グリッドの正方形の比容積は、チャンバーの製造元によって異なる場合がありますが、多くの場合、チャンバーの深さは0.1です。 ミリメートル、大きな正方形の面積は1平方ミリメートル、小さな正方形の面積は0.04平方です。 ミリメートル。 したがって、大きな正方形の体積は0.1立方ミリメートルになります。 この例では、5つの正方形で合計103個のセルをカウントし、希釈係数が10になるまで最初のサンプルを希釈したと仮定します。-2.
各グリッドの正方形の体積が0.1立方ミリメートルで、5つを数えた場合、数えられたチャンバーの総体積は0.5立方ミリメートルであり、103個のセルがありました。 2倍にして1立方ミリメートルにすると、206セルになります。 1立方センチメートルは1ミリリットルに相当し、液体の測定に役立ちます。 立方センチメートルには1,000立方ミリメートルがあります。 したがって、1立方センチメートルまたは1ミリリットルの懸濁液があった場合、206,000（206 x 1,000）個の細胞を数えることになります。 これは方程式としてどのように見えるかです：
グリッドの正方形の体積×カウントされた正方形の数=カウントされたサスペンションの総体積
細胞数÷カウントされた懸濁液の量=立方ミリメートルあたりの細胞数
立方体のミリメートルあたりの細胞数×1000 =ミリリットルあたりの細胞数
最初の溶液を顕微鏡で数えられるようにするために実行される希釈を考慮する必要があります。 この例では、希釈係数は10です。-2. 溶液の初期濃度を計算するには：
ミリリットルあたりの細胞数÷希釈係数=細胞濃度
この例では、1ミリリットルあたりの細胞数は206,000であり、それを10で割っています。-2 （0.01）は、初期サンプルで1ミリリットルあたり20,600,000細胞の細胞濃度を示します。