ウイルス力価を計算する方法

ウイルスの力価を計算することは、科学者が特定のサンプル中のウイルスの数を数えているという複雑な言い方です。 ウイルス力価を計算するために、科学者は成長中の細菌のプレートにさまざまな濃度のウイルス溶液を感染させ、 ウイルスが原因で死んだ細菌を数えることにより、元の溶液中のウイルスの数を把握します 感染。

手袋をはめ、10本の培養管に9 mlのブロスを入れ、「10 ^ -1」、「10 ^ -2」、「10 ^ -3」、および 「10 ^ -10」まで続きます。 これらのチューブは、ファージの計算に使用されるウイルスの段階希釈に使用されます 力価。 ウイルスは非常に高濃度に増殖する可能性があるため、効果的にカウントするにはウイルスを希釈する必要があります。 各チューブは、ウイルスの10倍希釈を表しています。

「10 ^ -1」というラベルの付いたチューブから混合培養物1mlを取り出し、新しいピペットで「10 ^ -2」というラベルの付いた次のチューブに移します。 このチューブも混ぜます。

このパターンを続けて、段階希釈系列を作成します。 最終的には9mlのチューブが9本、10mlのチューブが1本になります。 チューブ内のウイルス量は、10倍(最初のチューブ)または100倍(2番目のチューブ)から100億倍(最後のチューブ)までどこでも希釈されます。

寒天に細菌培養液を2滴加え、穏やかに混合します。 これらは殺されるバクテリアであり、特定の溶液中のウイルス粒子の数を数えることができます。

チューブがまだ湯浴にある間に、対応する寒天チューブに各段階希釈液1mlを追加します。 たとえば、1mlの10 ^ -1段階希釈液を「10 ^ -1」というラベルの付いた寒天チューブに入れます。

各チューブを混合してから、対応するラベルが付いたペトリ皿に各チューブを注ぎます。 これにより、各プレートにバクテリアやウイルスが接種された寒天の薄層が作成されます。 プレートをインキュベーターで一晩成長させます。

インキュベーターからプレートを取り出し、調べます。 プラークと呼ばれる小さな透明なスポットを除いて、細菌が増殖したプレート全体に曇りの領域が表示されるはずです。 これらのプラークは死んだバクテリアのパッチであり、各プラークは1つのウイルスを表しています。

プレートにあるプラークの数を取り、10を掛けます。 157個のプラークを数えた場合、1570個になります。

instagram story viewer

前のステップで得た数に、希釈チューブの数の逆数を掛けます。 たとえば、選択したプレートが10 ^ -5プレートの場合、1570に10 ^ 5を掛けると、157000000になります。 この最終的な数値はファージ力価であり、元の培養物1mlあたりのウイルス数を表します。

Teachs.ru
  • シェア
instagram viewer