TAクローニングは、ポリメラーゼ連鎖反応（PCR）産物をサブクローニングするためのシンプルで便利な方法です。 「TA」は「チミン」と「アデニン」の略です。 このクローニング技術は、リガーゼの存在下でチミンがアデニンにハイブリダイズする能力を利用しています。 従来のサブクローニング法とは異なり、制限酵素は使用していません。 代わりに、PCR産物はTaqポリメラーゼ酵素を使用して増幅されます。
方法
TAクローニング法では、PCR産物の両端にある特定のデオキシリボ核酸オーバーハングの末端トランスフェラーゼ活性を使用します。
Tベクターと呼ばれる単一の3つのprime-T（3'-T）オーバーハングを持つ線形化されたクローニングベクターを使用して、このPCR産物をプラスミドベクターにクローニングします。 PCR産物はこのベクターと高い比率で混合されます。
DNAリガーゼ（T4リガーゼ）が混合物に追加され、2つの製品がハイブリダイズして結合できるようになります。
長所と短所
TAクローニングは、線形化されたベクターでPCR産物をサブクローニングする便利な方法であり、従来のサブクローニング方法よりもはるかに簡単で高速です。 この方法は制限酵素を使用しないため、制限酵素部位のない製品のクローンを作成できます。
欠点は、TAクローニングキットが非常に高価であるため、その使用が制限されていることです。 その上、方向性のあるクローンはありません。 したがって、反対方向にクローンを作成する可能性が高くなります。
TAクローニングキット
いくつかのメーカーがTAクローニングキットを販売しています。 一部には、Invitrogen、QIAGEN、PremierBiosoftがあります。