酵素活性に対するpHの影響をテストするときは、pHを変える必要があります。 ただし、これは良い方法でも悪い方法でも実行できます。 さまざまなpHの影響を混乱させる可能性のある追加の要因を覚えておいてください。 そうでなければ、得られた結果はpHの変化によるものではなく、他の何らかの要因によるものである可能性があります。 pHを適切に変化させる方法と、実験のpHを混乱させる要因を知ることは、良い結果を得るのに役立ち、結果が期待したものと正確に一致しない理由を理解するのに役立ちます。
1つだけ変更する
酵素活性に対するpHの影響をテストするときは、他の要因を一定に保ちながらpHのみを変化させます。 これらの他の要因には、酵素濃度、基質濃度、および温度が含まれます。 一定のままである要因は、制御変数と呼ばれます。 制御変数を使用すると、実験で得られた酵素活性の結果は、独立変数であるpHの変化によるものであると結論付けることができます。 実験で変化しない要素を知ることは、変化する要素を知ることと同じくらい重要です。 そうしないと、結果が実際に1つの原因によるものかどうかを判断するのが困難になります。 テスト済み。
1つの酸または1つの塩基を選択してください
溶液のpHは、さまざまな量の酸または塩基を水に溶解することで変更できます。 酵素活性に対するpHの影響をテストする1つの方法は、強酸または強塩基を徐々に滴下することです。 酵素を含む溶液に入れ、酵素活性が低下するポイントを観察するか、 停止します。 酸は、プロトン（H +）と呼ばれる水素イオンを供与する化合物として定義され、塩基は、水酸化物イオン（-OH）を供与する化合物として定義されます。 酸と塩基が異なれば、放出するプロトンまたは水酸化物イオンの数も異なります。 酸または塩基を溶液に加えると、すべてのプロトンまたは水酸化物イオンがすぐに供与されるわけではありませんが、供与されるプロトンまたは水酸化物イオンの数によって、さまざまな速度でpHが変化します。 したがって、1種類の酸または1種類の塩基のみを使用して酵素実験でpHを変化させることをお勧めします。 そうしないと、他の変数が意図せずに追加されます。
組織もpHを変化させる
酵素活性を研究するいくつかの実験室実験では、新鮮な組織を粉砕して細胞から酵素を放出し、次に基質を加えて酵素活性を測定します。 新鮮な組織には血液が含まれています。 血液中に溶解している二酸化炭素ガスを炭酸に変える酵素が血液中に存在するため、組織自体がpHに影響を与える可能性があります。 したがって、新鮮な組織での酵素活性を伴う実験では、組織を粉砕する前に冷水のビーカーで血液を洗い流すことが役立ちます。 これにより、組織による意図しないpHの変化が最小限に抑えられるため、意図的なpHの変化を調べることができます。
サイズを同じに保つ
上記のように、酵素濃度は、酵素活性に対するpHの影響をテストするときに変更してはならない制御因子です。 ただし、実験手順は依然として本質的に微妙な方法で酵素濃度を変化させます。 酵素の純粋な溶液を使用している場合は、酵素濃度を一定に保ちます。 ただし、酵素がジャガイモの塊、植物の断片、肝臓の断片などの新鮮な組織に由来する実験では、塊のサイズによって各試験管内の酵素の量が変化します。 したがって、組織片をできるだけ均一に切断することが役立ちます。 これは、何を変更しないかを知ること、および変更を完全に回避しないことが難しい理由を知ることが、pHなどの要因を変化させた結果を解釈するのに役立つもう1つの例です。