לאחר שהפעלת דגימות DNA על ג'ל אגרוזה וצילמת תמונה, תוכל לשמור את התמונה להמשך, ובשלב זה תוכל לנתח את התוצאות ולפרש אותן. סוגי הדברים שאתה מחפש יהיו תלויים באופי הניסוי שלך. אם אתה עושה טביעת אצבעות DNA, למשל, תרצה להשוות את גודל חלקי ה- DNA משתי דגימות - מהחשוד ומדגימת זירת פשע, אולי. אם אתה עובד עם פלסמידים מחיידקים, לעומת זאת, ייתכן שיהיה עליך לוודא שהפלסמיד מכיל את התוספת. כתוצאה מכך, האופן שבו אתה מפרש את הג'ל שלך יהיה תלוי בחלקו בניסוי שעשית. עם זאת, ישנם כמה כללים כללים שתוכלו להחיל.
שים לב שייתכן שתצטרך להשתמש בהוראות בסעיף זה. לעתים קרובות נעשה שימוש באלקטרופורזה של ג'ל אגרוז כדי לאשר שפלסמיד מכיל תוספת נתונה. אם אינך עובד עם פלסמידים, תוכל לדלג על חלק זה. אם כן, תוכל לבצע את ההוראות האלה.
שים לב שאם אתה עובד עם פלסמידים שלא נחתכו או נקודים, אתה לא יכול לאמוד את הגודל לפי ההליך מסעיף 1 לעיל. הסיבה לכך היא שפלסמידים לא חתוכים ונקודים נודדים בקצב שונה מ- DNA ליניארי.
השווה את מספר הלהקות בכל נתיב. נזכיר כי אנזים הגבלה חותך DNA באתרים בהם מתרחש רצף נתון הנקרא אתר ההגבלה. אם דגימה טופלה בשני אנזימי הגבלה, רצועה עבור הכנס ורצועה לשארית הפלסמיד צריכות להיות נוכחות. הסיבה לכך היא שהמוסף יוקף על ידי שני אתרי הגבלה, כל אחד עבור אנזים אחר, כך שחתכים בשני האתרים הללו ישחררו את הכנס מהפלסמיד. חתך באתר אחד בלבד, לעומת זאת, יהפוך את הפלסמיד ל- DNA ליניארי. מדגם שנחתך ללא אנזימי הגבלה או אנזים הגבלה אחד, אם כן, צריך לכלול רצועה אחת, ואילו דגימה עם שני אנזימי הגבלה צריכה להיות כוללת שתי רצועות.
חפשו אחר להקות שנוצרו על ידי DNA פלסמיד מכונה. לפלסמיד עם ניקוד חתך בגדיל יחיד בלבד, ולכן הוא נודד לאט יותר מאשר פלסמיד חתוך. פלסמידים חתוכים בתורם נודדים לאט יותר מאשר DNA שלא נחתך.
הערך את גודל ההוספה לפי הנוהל המתואר בסעיף 1 וקבע אם הוא תואם את הציפיות שלך (שישתנו בהתאם לניסוי).
דברים שתזדקק להם
- עִפָּרוֹן
- עיתון
- תוכנית גיליון אלקטרוני
- תמונה של הג'ל שלך
- סרגל
