Titrasi adalah eksperimen kimia di mana Anda menetes -- "menitrasi" -- satu zat ke zat lain menggunakan tabung gelas (buret) dan gelas kimia. Dalam titrasi asam-basa, Anda mentitrasi basa menjadi asam hingga mencapai "titik ekivalen", atau larutan netral dengan pH 7. Sebelum ini terjadi, larutan dalam gelas kimia Anda adalah "larutan penyangga", larutan yang menahan perubahan pH ketika Anda menambahkan sedikit asam. Anda dapat menunjukkan sejauh mana asam Anda terdisosiasi -- dan dengan demikian mengubah pH larutan -- menggunakan nilai "pKa", dan Anda dapat menghitung nilai ini menggunakan data dari percobaan titrasi Anda.
Pilih titik pada kurva titrasi Anda sebelum titik ekivalen dan catat pH-nya, yang merupakan koordinat vertikal kurva. Sebagai contoh, misalkan Anda menganalisis larutan pada titik ketika pH-nya 5,3.
Tentukan rasio asam terhadap basa konjugasinya pada titik ini, dengan mengingat volume yang perlu Anda tambahkan untuk mencapai titik ekivalen. Misalkan Anda perlu menambahkan 40 mL untuk mencapai titik ekivalen. Jika, pada titik ketika pH 5,3, Anda telah menambahkan 10 mL, itu berarti Anda sudah seperempat jalan menuju titik ekivalen. Dengan kata lain, tiga perempat asam masih perlu dinetralkan, dan basa konjugasi asam menyumbang seperempat larutan pada titik ini.
Masukkan nilai Anda ke dalam persamaan Henderson-Hasselbalch, pH = pKa + log ([A-]/[HA]), di mana [A-] adalah konsentrasi basa konjugat dan [HA] adalah konsentrasi asam konjugat. Ingatlah bahwa karena Anda telah mengukur pH sebagai fungsi volume titran, Anda hanya perlu mengetahui rasio basa konjugasi terhadap asam. Pada saat larutan contoh memiliki pH 5,3, ini adalah (1/4)/(3/4), atau 1/3: 5,3 = pKa + log (1/3) = pKa + -.48; jadi 5.3 + .48 = pKa + -.48 + .48, atau pKa = 5,78.