Le test Western blot, également appelé immunoblot, est un test pour une protéine spécifique dans un mélange de protéines. Le test Western blot est effectué après une électrophorèse sur gel ou un test ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay), et il utilise des anticorps pour identifier des protéines spécifiques.
L'électrophorèse sur gel de polyacrylamide dodécyl sulfate de sodium (SDS-PAGE) est un test courant utilisé pour séparer les protéines à utiliser dans le Western blot. Les protéines sont séparées par leur poids et leurs propriétés électriques lorsqu'elles se déplacent à travers une matrice de gel.
Le test ELISA utilise des enzymes ou des anticorps attachés à une surface solide pour créer la surface de test. Un échantillon est ensuite ajouté à la surface d'essai. Les anticorps ou les enzymes réagissant ou se fixant aux protéines indiquent un résultat positif.
Le test Western blot est réalisé après l'électrophorèse sur gel. Les protéines séparées sont transférées (ou transférées) sur des membranes de nitrocellulose ou de nylon et identifiées par des anticorps spécifiques qui sont marqués par une protéine secondaire.
Le test Western blot est utilisé pour confirmer les résultats positifs des tests d'électrophorèse sur gel ou ELISA. Le test Western blot permet d'identifier plus spécifiquement les protéines et peut exclure les faux positifs.