Una vez que haya analizado las muestras de ADN en un gel de agarosa y haya tomado una foto, puede guardar la foto para más adelante, momento en el que puede analizar los resultados e interpretarlos. El tipo de cosas que busca dependerá de la naturaleza de su experimento. Si está tomando huellas dactilares de ADN, por ejemplo, querrá comparar el tamaño de las piezas de ADN de dos muestras: del sospechoso y de una muestra de la escena del crimen, tal vez. Si está trabajando con plásmidos de bacterias, por el contrario, es posible que deba asegurarse de que el plásmido contenga el inserto. En consecuencia, la forma en que interprete su gel dependerá en parte del experimento que hizo. No obstante, existen algunas reglas generales que puede aplicar.
Tenga en cuenta que puede que necesite o no utilizar las instrucciones de esta sección. La electroforesis en gel de agarosa se usa a menudo para confirmar que un plásmido contiene un inserto determinado. Si no está trabajando con plásmidos, puede omitir esta sección. Sin embargo, si es así, puede seguir estas instrucciones.
Tenga en cuenta que si está trabajando con plásmidos sin cortar o mellados, no puede estimar el tamaño utilizando el procedimiento de la sección 1 anterior. Eso es porque los plásmidos sin cortar y mellados migran a diferentes velocidades del ADN lineal.
Compare el número de bandas en cada carril. Recuerde que una enzima de restricción corta el ADN en sitios donde ocurre una secuencia determinada llamada sitio de restricción. Si una muestra se trató con DOS enzimas de restricción, deben estar presentes una banda para el inserto y una banda para el resto del plásmido. Esto se debe a que el inserto estará flanqueado por dos sitios de restricción, cada uno para una enzima diferente, por lo que los cortes en ambos sitios liberarán el inserto del plásmido. Un corte en un solo sitio, por el contrario, convertirá el plásmido en ADN lineal. Un corte de muestra sin enzimas de restricción o una enzima de restricción, entonces, debe presentar una sola banda, mientras que un corte de muestra con dos enzimas de restricción debe presentar dos bandas.
Busque bandas creadas por ADN plasmídico mellado. Un plásmido mellado tiene un corte en una sola hebra, por lo que migra más lentamente que un plásmido cortado. Los plásmidos cortados, a su vez, migran más lentamente que el ADN sin cortar.
Estime el tamaño del inserto utilizando el procedimiento descrito en la Sección 1 y determine si coincide con sus expectativas (que variarán según el experimento).
Cosas que necesitará
- Lápiz
- Papel
- Hoja de cálculo
- Imagen de tu gel
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