¿Qué es el ADN recombinante?
El ADN recombinante es una secuencia de ADN que se ha creado artificialmente en el laboratorio. El ADN es la plantilla que utilizan las células para producir las proteínas que forman los organismos vivos, y la disposición de las bases nitrogenadas a lo largo de una hebra de ADN determina qué proteínas se forman. Al aislar trozos de ADN y recombinarlos con otras secuencias, los investigadores pueden clonar ADN dentro de bacterias u otras células huésped y producir proteínas útiles, como la insulina. La clonación permite un estudio mucho más fácil de secuencias de ADN particulares, ya que produce una gran cantidad de ADN que luego puede modificarse y analizarse.
Métodos de construcción de ADN recombinante
La transformación es un proceso mediante el cual se inserta un segmento de ADN en un plásmido, un pequeño círculo de ADN autorreplicante. El ADN se corta utilizando enzimas de restricción. Estas enzimas se producen en las células bacterianas como un mecanismo de defensa, y se dirigen a sitios particulares en una molécula de ADN y la cortan en pedazos. Las enzimas de restricción son particularmente útiles porque crean "extremos pegajosos" en los segmentos de ADN. Al igual que el velcro, estos extremos pegajosos permiten que el ADN se una fácilmente con los segmentos complementarios.
El gen de interés y los plásmidos están expuestos a la misma enzima de restricción. Esto crea muchas moléculas diferentes. Algunos son plásmidos que contienen el gen de interés, algunos son plásmidos que contienen otros genes, algunos son dos plásmidos juntos. Luego, los plásmidos se reintroducen en las células bacterianas, donde se replican, y la molécula de ADN recombinante buscada se identifica mediante diferentes tipos de análisis. Por ejemplo, si el plásmido se corta en un gen en particular, los científicos pueden buscar células que no expresen ese gen y así identificar una recombinación exitosa.
La transformación no bacteriana es esencialmente el mismo proceso, pero utiliza células no bacterianas como huéspedes. El ADN se puede inyectar directamente en el núcleo de una célula huésped. Los investigadores también pueden bombardear una célula con partículas metálicas microscópicas que han sido recubiertas con ADN.
La transfección es muy similar a la transformación, pero se utilizan fagos en lugar de plásmidos. Un fago es un virus que infecta a las bacterias. Tanto los fagos como los plásmidos son ideales para este proceso, ya que se replicarán rápidamente dentro de una célula bacteriana.
Clonación y uso de secuencias de ADN recombinante
Una vez que los investigadores han identificado las células bacterianas particulares que contienen la secuencia recombinante, pueden hacer crecer esas células en un cultivo y generar grandes cantidades del gen. Es difícil conseguir que las células bacterianas generen realmente una proteína a partir de una célula huésped humana o animal, pero existen formas de modificar la expresión génica para facilitar dicha producción. Si se utilizan células nucleadas como células huésped (como en la transformación no bacteriana), las células tendrán menos problemas para expresar el gen recombinante.
Una vez que los genes se clonan en grandes cantidades, pueden almacenarse en bibliotecas de ADN, secuenciarse y estudiarse. La tecnología del ADN recombinante ha permitido muchos descubrimientos importantes en medicina forense, el estudio de enfermedades genéticas, agricultura y productos farmacéuticos.
