Un microbiólogo usa tinción con quitina para poder ver los hongos con claridad bajo el microscopio. Los hongos usan quitina como material estructural en sus paredes celulares para que la mancha muestre bien la pared celular. La mancha de azul de algodón con lactofenol es la mancha más común para los hongos. El fenol mata los microorganismos y evita que las enzimas fúngicas descompongan la célula. El tinte azul algodón convierte la quitina en azul. La tinción con quitina es un procedimiento relativamente sencillo con materiales económicos. Puedes hacer tu propio tinte o comprar tinte preparado comercialmente.
Prepare una solución de lactofenol algodón azul. Pese 0,05 gramos de tinte azul de algodón con una balanza sensible. Mezclar el tinte con 20 mililitros de agua destilada en un tubo de ensayo y dejar actuar durante la noche.
Póngase guantes antes de terminar la preparación de la mancha al día siguiente. Coloque 20 ml de ácido láctico en un vaso de precipitados y mézclelo con 20 g de cristales de fenol. Revuelva hasta que la mezcla se disuelva. Agregue 40 ml de glicerol y mezcle. Luego cuele la solución de azul algodón a través de un trozo de papel de filtro en el vaso de precipitados y mezcle bien.
Alternativamente, use una fuente de tinte preparada comercialmente. Guarda la mancha a temperatura ambiente.
Etiquete un portaobjetos de microscopio con el nombre o número de identificación de la muestra. Utilice un gotero estéril para poner una sola gota de una muestra de agua en el centro del portaobjetos del microscopio. Para una muestra seca, coloque una sola gota de solución de alcohol al 70 por ciento en el portaobjetos y luego use un asa estéril para mezclar la muestra seca con el alcohol.
Use un gotero limpio para transferir dos gotas del tinte azul de algodón con lactofenol al centro del portaobjetos. Si está usando alcohol al 70 por ciento en el portaobjetos, hágalo antes de que el alcohol se evapore del portaobjetos.
Toque un borde del cubreobjetos del microscopio con un borde de la preparación de la muestra húmeda. Deje que el deslizamiento caiga suavemente sobre la preparación de la muestra, asegurándose de que no atrape burbujas de aire debajo del portaobjetos. La muestra teñida ya está lista para ser examinada bajo el microscopio.