Existen muchos métodos para separar e identificar diferentes compuestos. Cromatografia es la ciencia que le permite separar los componentes de una mezcla. La RF (a veces escrito informalmente como "valor rf") es parte de eso.
Hay muchos tipos diferentes de cromatografía. Aquí, el enfoque es el tipo de cromatografía más simple: cromatografía en papel o cromatografía en capa fina (TLC). Ambos utilizan el mismo procedimiento general, que se describe a continuación.
¿Qué implica la cromatografía?
Todos los tipos de cromatografía tienen un fase estacionaria y un fase móvil. La fase estacionaria, como puede adivinar por el nombre, no se mueve. En la cromatografía de papel, la fase estacionaria es el papel en sí.
Para comenzar la separación de compuestos, la sustancia a analizar se puntea en el borde inferior de la hoja de papel. Luego, el papel se coloca en un vaso de precipitados que contiene la fase móvil, que es un solvente. El solvente debe estar debajo del lugar donde está punteada la sustancia para el análisis. No debe sumergir el analito.
El líquido sube por el papel por capilaridad. Si el analito o parte del analito se siente atraído por la fase móvil, se moverá con él. Si tiene una atracción más fuerte por la fase estacionaria, no se moverá.
Una vez que el solvente ha subido la fase estacionaria hasta cierto punto, tiene un cromatograma. Este cromatograma le dice algo sobre la separación de diferentes componentes en una mezcla o le dice qué sustancia tiene. ¿Cómo?
Separación e identificación de componentes mediante un cromatograma
Si las condiciones para desarrollar un cromatograma son las mismas, entonces la distancia que se mueve una sustancia en particular debería cambiar. Esta distancia se mide por el fórmula del factor de retención o RF.
La fórmula del factor de retención es:
Este valor debe ser el mismo para una sustancia cuando el cromatograma se desarrolla de la misma manera.
Esto es útil cuando tiene una mezcla de sustancias.
Por ejemplo, supongamos que tiene cuatro muestras: tres son estándares y una es una mezcla. Su trabajo es identificar qué componentes están en la mezcla.
¿Qué son los estándares? Los estándares son una muestra pura de una sustancia. Esto se puede ejecutar en el cromatograma como comparación.
La mezcla se puede ejecutar, después de lo cual puede determinar hasta qué punto se ejecutan los diferentes componentes.
Digamos que el Estándar # 1 tiene una fuerte afinidad por el agua (la fase móvil). Esto significa que viajará por el papel con la fase móvil. El estándar # 2, por otro lado, tiene una fuerte afinidad por el papel. Esto significa que permanecerá con la fase estacionaria. Por último, el Estándar n. ° 3 tiene afinidad tanto por el agua como por el papel. Predice que se moverá una cantidad intermedia.
Encuentra que el solvente se mueve 5.7 cm mientras que el Estándar # 1 se mueve 0.5 cm, el Estándar # 2 se mueve 4.8 cm y el Estándar # 3 se mueve 2.9 cm. Que son las RF valores para cada estándar?
Ahora, conoces la RF valores para los estándares. A continuación, en otra hoja de papel colocas un punto de la mezcla y dejas que se desarrolle el cromatograma colocándolo en agua.
Una vez eliminado, encontrará que hay dos puntos que se separaron del punto inicial que colocó. Esto probablemente significa que solo hay dos componentes en su mezcla. A continuación, debe averiguar a cuál de los estándares corresponden estos dos componentes. Para hacer esto, mides la RF valores.
El solvente se movió 4.5 cm. Un componente (llamado componente 1) se movió 2.2 cm y el otro 3.9 cm (llamado componente 2). Para ver a qué estándar corresponden estos componentes, deberá usar la fórmula del factor de retención para calcular el RF valores.
Dados estos RF valores, es probable que el componente 1 corresponda a la Norma n. ° 3 ya que la RF los valores son muy similares. Es probable que el componente 2 sea el estándar n. ° 2.