La HPLC ofrece un método rápido, automatizado y altamente preciso para identificar ciertos componentes químicos en una muestra, pero puede ser costoso, complejo y no funciona para todas las muestras. Los laboratorios médicos, forenses, ambientales y de fabricación utilizan la técnica para cuantificar y separar los productos químicos en una muestra. La HPLC tiene ventajas y desventajas en comparación con otras técnicas.
HPLC y técnicas similares
Al igual que otras formas de cromatografía, la HPLC permite la separación de componentes químicos mediante el uso de una fase móvil y una fase estacionaria. La fase móvil es líquida y la fase estacionaria es sólida. Debido a que los diferentes componentes se mueven a diferentes velocidades, se separan entre sí. Las técnicas alternativas incluyen la electroforesis capilar, donde las sustancias migran a través de soluciones en un campo, y otros métodos cromatográficos como extracción en fase sólida, cromatografía de gases y capa fina cromatografía.
Velocidad, eficiencia y precisión
En comparación con otras técnicas cromatográficas, como la TLC, la HPLC es extremadamente rápida y eficiente. Utiliza una bomba, en lugar de la gravedad, para forzar un solvente líquido a través de un material adsorbente sólido, con diferentes componentes químicos que se separan a medida que se mueven a diferentes velocidades. El proceso se puede completar en aproximadamente 10 a 30 minutos y ofrece alta resolución. Es preciso y altamente reproducible. Debido a que está en gran parte automatizado, las ejecuciones básicas de HPLC se pueden realizar con una formación mínima.
Costo y complejidad
A pesar de sus ventajas, la HPLC puede ser costosa y requiere grandes cantidades de compuestos orgánicos costosos. Las técnicas como la extracción en fase sólida y la electroforesis capilar pueden ser más baratas e incluso más rápidas, especialmente para análisis con buenas prácticas de fabricación. Aunque es relativamente fácil utilizar los métodos de HPLC existentes, puede resultar complejo solucionar problemas o desarrollar nuevos métodos. Esto se debe en gran parte a la variedad de diferentes módulos, columnas y fases móviles.
Sensibilidad y resolución
En general, la HPLC es versátil y extremadamente precisa cuando se trata de identificar y cuantificar componentes químicos. Con muchos pasos involucrados, la precisión de HPLC depende en gran medida de que el proceso esté automatizado y, por lo tanto, sea altamente reproducible. La HPLC tiene una baja sensibilidad para ciertos compuestos y algunos no se pueden detectar porque se adsorben de manera irreversible. Las sustancias volátiles se separan mejor mediante cromatografía de gases.