Ya sea que necesite desgasificar o desairear, su solución tampón dependerá de su aplicación. Si la presencia de un exceso de oxígeno en el tampón afectará a la reacción química que está buscando, o si la formación de burbujas de aire en la solución afectará las lecturas o el flujo, tendrá que desgasificar su buffer. Este artículo asume que ya ha preparado su búfer y lo ha filtrado si es necesario.
La desgasificación por vacío es la forma más común de eliminar el aire de una solución tampón. Coloque su solución en un matraz de brazo lateral con una barra de agitación y use un tapón de goma para sellar la parte superior. Coloque el matraz en una placa de agitación y encienda la placa de modo que la barra de agitación gire a velocidad media. Esto ayuda a sacar el aire de la solución. Conecte la manguera para el sistema de vacío al brazo lateral del matraz y encienda el vacío a baja velocidad. Deje que la solución se desgasifique durante al menos una hora.
Usando la misma configuración con el matraz de brazo lateral y el vacío, puede omitir la placa de agitación y la barra de agitación y colocar el matraz en un sonicador. El sonicador usa ondas sonoras que liberarán más aire de su solución que la barra de agitación.
El burbujeo de helio, también llamado burbujeo de helio o purga de gas inerte, es una de las formas más efectivas de desgasificar su tampón si tiene una línea de helio en su laboratorio. Coloque una frita burbujeante, un conector que tiene un filtro similar a una piedra al final, al final de su línea de helio y coloque la línea y la frita en su solución. Encienda el helio a una presión muy baja durante unos cinco minutos para permitir que el helio elimine el oxígeno. Esto puede tener que repetirse a diario.
Algunos sistemas de cromatografía tendrán un desgasificador de solución en línea. El sistema eliminará el gas de su tampón antes de enviarlo a través de la columna de cromatografía. No es necesario desgasificar la solución de antemano. Sin embargo, si está experimentando ruido de línea de base en su cromatograma, debe considerar la desgasificación usando uno de los métodos anteriores además de usar el desgasificador en línea.