Το τεστ Western Blot, που ονομάζεται επίσης ανοσοκηλίδωση, είναι ένα τεστ για μια συγκεκριμένη πρωτεΐνη σε ένα πρωτεϊνικό μείγμα. Η δοκιμή στύπωσης Western πραγματοποιείται μετά από ηλεκτροφόρηση πηκτής ή μια δοκιμασία ανοσοπροσροφητικής ανάλυσης συνδεδεμένης με ένζυμο (ELISA) και χρησιμοποιεί αντισώματα για τον προσδιορισμό συγκεκριμένων πρωτεϊνών.
Η ηλεκτροφόρηση πηκτής πολυακρυλαμιδίου θειικού νατρίου δωδεκυλίου (SDS-PAGE) είναι μια κοινή δοκιμή που χρησιμοποιείται για τον διαχωρισμό πρωτεϊνών για χρήση στο στύπωμα Western. Οι πρωτεΐνες διαχωρίζονται κατά βάρος και ηλεκτρικές ιδιότητες καθώς κινούνται μέσω μιας μήτρας γέλης.
Η δοκιμή ELISA χρησιμοποιεί ένζυμα ή αντισώματα προσκολλημένα σε μια στερεή επιφάνεια για τη δημιουργία της επιφάνειας δοκιμής. Στη συνέχεια προστίθεται ένα δείγμα στην επιφάνεια δοκιμής. Τα αντισώματα ή τα ένζυμα που αντιδρούν ή προσκολλώνται σε πρωτεΐνες υποδηλώνουν θετικό αποτέλεσμα.
Η δοκιμή στύπωσης Western πραγματοποιείται μετά την ηλεκτροφόρηση πηκτής. Οι διαχωρισμένες πρωτεΐνες μεταφέρονται (ή στυπώνονται) σε μεμβράνες νιτροκυτταρίνης ή νάιλον και ταυτοποιούνται από ειδικά αντισώματα που επισημαίνονται από μια δευτερεύουσα πρωτεΐνη.
Το τεστ Western Blot χρησιμοποιείται για την επιβεβαίωση θετικών αποτελεσμάτων είτε από ηλεκτροφόρηση γέλης είτε από δοκιμές ELISA. Το τεστ Western Blot μπορεί να προσδιορίσει τις πρωτεΐνες πιο συγκεκριμένα και μπορεί να αποκλείσει ψευδώς θετικά.