Τα ρυθμιστικά διαλύματα αντιστέκονται στις αλλαγές στο pH επειδή περιέχουν ασθενή συζυγή οξέος-βάσης που εξουδετερώνουν τα ιόντα Η + και ΟΗ. Τα ρυθμιστικά διαλύματα αποτελούνται από ασθενή οξέα ή βάσεις και το άλας αυτού του οξέος ή βάσης. Η επιλογή ενός κατάλληλου ρυθμιστικού συστήματος εξαρτάται από το εύρος pH για την αποθήκευση. Οι περισσότερες βιολογικές αντιδράσεις συμβαίνουν σε εύρος pH 6 έως 8. Ρυθμιστικό διάλυμα φωσφορικών σε ρυθμιστικό διάλυμα από 6,5 έως 7,5. Τα ρυθμιστικά διαλύματα καρβοξυλικού οξέος είναι χρήσιμα από ρΗ 3 έως 6. Τα ρυθμιστικά διαλύματα βορικών λειτουργούν από pH 8,5 έως 10. Τα ρυθμιστικά διαλύματα αμινοξέων όπως η γλυκίνη και η ιστιδίνη αποδίδουν σε μια ποικιλία από εύρη ρΗ. Το Tris buffer είναι ένα από τα συνηθέστερα χρησιμοποιούμενα ρυθμιστικά συστήματα στα εργαστήρια βιολογίας. Οι υπολογισμοί για ένα διάλυμα ρυθμιστικού διαλύματος Tris θα χρησιμοποιηθούν στο ακόλουθο παράδειγμα, αλλά η μεθοδολογία εφαρμόζεται σε οποιοδήποτε διάλυμα ρυθμιστικού.
Χρησιμοποιήστε το προϊόν της τελικής λύσης και του όγκου του διαλύματος για να προσδιορίσετε γραμμομοριακές βάσεις που απαιτούνται. Για παράδειγμα, εάν χρειάζονται 2 λίτρα διαλύματος Tris 0,1 Μ ρυθμιστικού διαλύματος, τότε ο απαιτούμενος αριθμός γραμμομορίων Tris είναι:
Υπολογίστε τη μάζα του ρυθμιστικού που απαιτείται πολλαπλασιάζοντας τον αριθμό γραμμομορίων που απαιτείται από το μοριακό βάρος της βάσης. Για παράδειγμα, η μάζα των 0,2 mol της βάσης Tris ισούται με:
Διαλύστε τη βάση σε αποσταγμένο νερό χρησιμοποιώντας μαγνητική ράβδο ανάδευσης και θερμό πιάτο. Διαλύστε το σε όγκο νερού λίγο λιγότερο από τον όγκο του τελικού διαλύματος (950 έως 975 mL για κάθε λίτρο τελικού διαλύματος). Το pH του ρυθμιστικού διαλύματος Tris αλλάζει με τη συγκέντρωση και χρειάζεται αναπροσαρμογή εάν χρησιμοποιείται πολύ μικρό αρχικό όγκο. Είναι επίσης καλύτερο να προετοιμάσετε το ρυθμιστικό στην ίδια θερμοκρασία που θα χρησιμοποιηθεί κατά τη διάρκεια της ανάλυσης ή του πειράματος, καθώς το Tris έχει μεγάλες αλλαγές εξαρτώμενες από τη θερμοκρασία στο pH.
Συμβουλές
- Για να εξοικονομήσετε χρόνο κατά την προετοιμασία ενός ρυθμιστικού διαλύματος, μπορείτε να χρησιμοποιήσετε προκαταρκτικά συμπυκνωμένα ρυθμιστικά διαλύματος στο απαιτούμενο pH και να αραιώσετε για την επιθυμητή μοριακότητα και όγκο. Προετοιμάστε ρυθμιστικό διάλυμα στην ίδια θερμοκρασία που θα χρησιμοποιηθεί για την αποφυγή σημαντικών αλλαγών στο pH. Αποφύγετε χρονοβόρες ρυθμίσεις pH, τιτλοδοτείτε μόνο μετά από αραίωση στην επιθυμητή συγκέντρωση. Η διάλυση σε πολύ μικρό όγκο θα οδηγήσει σε επαναλαμβανόμενες τιτλοδοτήσεις.
Προειδοποιήσεις
- Να είστε προσεκτικοί όταν χειρίζεστε οξέα και βάσεις. Φοράτε προστατευτικά γυαλιά.
Σχετικά με τον Συγγραφέα
Η Carla Boulianne είναι εξελικτική βιολόγος με εκπαίδευση και ανεξάρτητος συγγραφέας από πάθος. Εκτός από το γράψιμο για τα Demand Studios και το eHow, είναι συγγραφέας χαρακτηριστικών για το Parenting a Gifted Child στο Suite101.com. Είναι ενθουσιασμένη στην εξερεύνηση νέων θεμάτων μέσω εκτεταμένης έρευνας.
Φωτογραφικές μονάδες
Φωτογραφία ευγενική προσφορά του Emmi P. @ morgueFile.com
