Изолационни техники за ивична плоча

Въпреки че не могат да се видят с просто око, бактериите са навсякъде. Те съществуват в храната, почвата, водата, повърхностите в домовете ни, както и в и върху телата ни. Обикновено бактериите съществуват в смесени популации. Изолирането на специфична бактерия от други бактериални видове в дадена проба позволява на микробиолозите да изследват нейната структура и функция, характеристики, използвани при нейната идентификация. Микробиолозите често изолират бактериите, използвайки една от няколкото техники с плочи с ивици.

Инструменти

За пренос на микроорганизми се използва инокулационна верига. Състои се от нихром или платинена тел с малък кръгъл контур в единия край. Другият край е прав и се плъзга в дръжка. Предлагат се и пластмасови еднократни циркулационни бримки. Бактериите могат да бъдат изолирани само ако растат. Микробиолозите отглеждат бактерии за изолиране на ивици в плитки, кръгли чашки на Петри, пълни с твърда среда, наречена агар. Агар имитира средата, в която бактериите естествено растат. Съдовете, пълни с медии, са стерилни и с капак, за да се предотврати растежа на нежелани организми. По време на изолирането на плочата с ивици, инокулационната верига се стерилизира многократно в пламъка на горелка на Бунзен.

Принцип

Техниката с ивичести плочи е най-популярният метод за изолиране на специфични бактерии от проба, съдържаща смес от микроорганизми. Техниката по същество разрежда броя на организмите и намалява тяхната плътност. Позволява на микробиолозите да различават и изолират отделни бактериални колонии. Колонията е видим клъстер от бактерии. Всички бактерии в една колония произхождат от една и съща бактериална клетка. Следователно отделните колонии са „чисти“ колонии. Чистата колония се прехвърля в друга плоча, за да се получи чиста култура, състояща се от един вид бактерии.

Процедура

Когато се извърши правилно, изолирането на плочи с прорези изтънява пробата и позволява на отделните бактериални клетки да се развият в изолирани колонии. Микробиологът започва със стерилизиране на инокулационната верига в пламък. Тя охлажда примката, като я докосва до агара, след това потапя примката в пробата и я разнася напред-назад, за да покрие част от плочата. Тя стерилизира цикъла, охлажда го и инокулира втори, съседен участък от плочата чрез влачене цикъла през първата секция няколко пъти и покривайки втората секция с помощта на зигзаг движение. Това улавя малък брой бактерии от първата секция и ги прехвърля във втората секция. Броят на повторенията на тази основна процедура зависи от използвания метод на ивицата. Въпреки метода, оригиналната проба се използва само за инокулиране на първата част на плочата.

Метод на плочата с ивици

Методите с плочи с ивици варират в зависимост от броя на просеките на агар. Методът T-streak използва три секции: горната половина и две еднакво големи долни секции. Първоначалният инокулум се поставя в горната половина на плочата. Бактериите се влачат от горната секция към една от долните секции, след това от тази долна секция към другата. При метода на квадранта четири еднакви по големина участъци са набраздени. Методът на непрекъснатото ивичене обикновено включва инокулиране на горната половина на плочата, завъртане на 180 градуса, и инокулиране на другата половина на плочата без стерилизиране на контура или влачене на бактерии от предишната раздел.

  • Дял
instagram viewer