Учените и изследователите изучават бактериалния растеж чрез подготовка на култури в лаборатория. Паничките на Петри, съдържащи хранителен агар, отглеждат бактериални култури с едно движение или инокулация. Студентите могат да приготвят хранителен агар у дома, използвайки доставки от хранителни магазини или магазини за здравословни храни за проект на научен панаир. Конвенционалните кухненски уреди и основните кухненски съдове предоставят инструментите за приготвяне на стерилна хранителна среда, която може да се дозира в чаши на Петри. Следването на стерилни техники чрез нагряване на материалите и поддържане на повърхностите чисти и сухи ще подобри резултатите, като предотврати замърсяването на културата с плесени и частици.
Поставете филтър за кафе в цедка и закачете цедката над отвора на чистата купа.
Бавно изсипете бульона във филтъра, като се уверите, че бульонът не прелива от страните на филтъра. Ако филтърът се запуши с частици, отстранете използвания филтър, заменете с чист филтър и продължете да наливате бульона.
Извадете цедката и филтъра от горната част на купата и наблюдавайте дали бульонът изглежда бистър (т.е. в течността няма суспендирани частици). Ако частиците плават в течността, повторете стъпки 1 и 2, като използвате втора прозрачна купа и филтър за прясно кафе.
Поставете тенджерата на котлона и изсипете бистрия бульон в тенджерата.
Добавете 16 унции дестилирана вода в тенджерата, съдържаща бульона.
Включете печката и регулирайте нагряването на средно ниска. Загрейте бульона на бавен огън (т.е. в близост до саксията се появяват малки мехурчета).
Добавете 1 чаена лъжичка прах от агар-агар към кипящия бульон (приблизително 2,5 грама) и разбъркайте сместа, докато прахът се разтвори. Не забравяйте да разбъркате праха, за да се разтвори и да предотвратите потъването на желатина на дъното на тенджерата (където може да изгори).
Повторете стъпка 7, докато целият прах от агар-агар се разтвори в бульона.
Продължете да бъркате бульона за около 1 минута, за да сте сигурни, че целият прах е напълно разтворен.
Изключете котлона, поставете капака върху тенджерата и оставете течността да се охлади поне 15 минути.
Подредете стерилните чашки на Петри в ред за лесно сглобяване, но не махайте капаците. Ако желаете, поставете шалте, за да държите топлото гърне. Ако използвате чаши с крем с капак вместо петри, стерилизирайте чашките с крем, като поставите чашите и капаците обърнете (с главата надолу) върху покрит с фолио бисквитен лист и печете във фурната поне един час при 375 градуса Фаренхайт. Уверете се, че стерилизираните чаши и капаци са напълно охладени преди употреба.
Внимателно докоснете външната страна на саксията, за да проверите дали е топла на допир и поставете тенджерата върху шалтето. Ако саксията е твърде гореща за докосване, изчакайте поне 10 минути, за да се охлади тенджерата.
Отстранете капака и оставете настрана. Поставете черпака в тенджерата.
Отстранете капака от една чаша Петри и разпределете хранителния бульон, за да напълните съда до половината. Покрийте веднага съда с капака му.
Повторете стъпка 14 за всяка от чашките на Петри.
Оставете хранителния бульон да се втвърди в чашките на Петри в продължение на поне 1 час, необезпокояван.
Внимателно разклатете чашките на Петри една до друга, за да проверите дали хранителният бульон се е втвърдил напълно. Ако бульонът не е напълно желиран, изчакайте още 20 минути, преди да проверите отново.
Покрийте маса или плоска повърхност с ролка хартиени кърпи, за да създадете стерилна работна зона. Откъснете лист хартиена кърпа и го сгънете четири пъти, за да създадете дебела, правоъгълна пачка. Поставете тази пачка в единия край на работната зона.
Прехвърлете една чашка на Петри в стерилната работна зона и отстранете капака. Внимателно обърнете съда и поставете единия му край отстрани на сгънатата вата, така че да лежи обърнат и леко под ъгъл (с лека процепа от хартиената кърпа).
Обърнете капака и го поставете над чашата на Петри върху стерилната работна повърхност. Ако на капака се появят капчици вода, внимателно изтръскайте тази влага, преди да я поставите върху покритата повърхност, но не докосвайте вътрешността на капака.
Повторете стъпки 19 и 20 за всяка чаша Петри, като поставите едната страна на обърнатата чиния отстрани на предишната чиния, вместо хартиената кърпа. Ястията ще изглеждат като разпределени на параметри, с пропуски от едната страна, така че излишната влага може да се изпари.
Погледнете обърнатите чашки на Петри, за да проверите дали влагата отстрани на плочите се е изпарила. След като цялата влага се изчисти, обърнете плочите с дясната страна нагоре и незабавно покрийте с капаците за употреба.
Инокулирайте хранителния агар върху плочата, като избършете тампон, съдържащ желаната култура, върху повърхността на хранителния агар, преди да покриете с капака. Обърнете чашата на Петри, така че твърдата част да е отгоре. Съхранявайте инокулираната чашка на Петри с твърдото вещество отгоре за култивиране и капака отдолу, за да хване влага, разхлабени частици или растеж.
Неща, от които ще се нуждаете
- Филтри за кафе
- Цедка
- 2 големи, ясни купи
- 16 унции. обезмаслен телешки бульон
- 16 унции. дестилирана вода
- Тенджера за готвене с капак
- Печка
- 10 грама агар агар
- Мерителна лъжица
- Бъркалка
- Ролка хартиени кърпи
- Поставки за саксии
- Метален черпак
- Стерилни чаши на Петри или прозрачни чаши с крем с капаци
- Незадължително: таймер, тривет, фурна, тиган, алуминиево фолио, тиган
Съвети
Ако върху капаците се появи прекомерна влага, изсушете и стерилизирайте капаците във фурната, настроена на 375 градуса по Фаренхайт за поне 1 час (поставете капаците в чист тиган, покрит с алуминиево фолио, преди да ги поставите в фурна).
Предупреждения
-
Бъдете внимателни при работа с горещата тенджера, за да избегнете изгаряния. Ако страната на гърнето е твърде гореща, течността в тенджерата е много гореща. Хранителният бульон трябва да е топъл за подаване в съдовете, но не прекалено горещ, за да се получи прекомерна кондензация в чашките на Петри по време на охлаждане и застиване.
Не докосвайте вътрешността на чашата на Петри (т.е. плоча или капак), за да избегнете попадането на нежелани бактерии в културата.