Има много методи за разделяне и идентифициране на различни съединения. Хроматография е науката, която ви позволява да разделяте компонентите на сместа. The Rе (понякога неофициално написано като "rf стойност") е част от това.
Има много различни видове хроматография. Тук фокусът е най-простият вид хроматография: хартиена хроматография или тънкослойна хроматография (TLC). И двамата използват една и съща обща процедура, която е описана по-долу.
Какво включва хроматографията?
Всички видове хроматография имат a стационарна фаза и а мобилна фаза. Стационарната фаза, както бихте могли да познаете от името, не се движи. При хартиената хроматография стационарната фаза е самата хартия.
За да започне разделянето на съединенията, веществото, което трябва да се анализира, се поставя върху долния ръб на листчето хартия. След това хартията се поставя в мензура, съдържаща подвижната фаза, която е разтворител. Разтворителят трябва да е под мястото, където веществото за анализ е изпъстрено. Не трябва да потапя аналита.
Течността се движи нагоре по хартията чрез капилярно действие. Ако аналитът или част от аналита е привлечен към подвижната фаза, той ще се движи заедно с него. Ако има по-силно привличане за неподвижната фаза, няма да се движи.
След като разтворителят до известна степен се придвижи нагоре към неподвижната фаза, имате хроматограма. Тази хроматограма ви казва нещо за разделянето на различни компоненти в смес или ви казва какво вещество имате. Как
Разделяне и идентифициране на компоненти с помощта на хроматограма
Ако условията за разработване на хроматограма са еднакви, разстоянието, което се движи дадено вещество, трябва да се промени. Това разстояние се измерва с формула на коефициент на задържане или Rе.
Формулата на коефициента на задържане е:
Тази стойност трябва да бъде еднаква за вещество, когато хроматограмата е разработена по същия начин.
Това е полезно, когато имате смес от вещества.
Например, да речем, че имате четири проби: три са стандарти и една е смес. Вашата работа е да определите кои компоненти са в сместа.
Какви са стандартите? Стандартите са чиста проба от вещество. Това може да се изпълни на хроматограмата като сравнение.
Сместа може да бъде пусната, след което можете да определите до каква степен различните компоненти в нея работят.
Кажете, че Стандарт №1 има силен афинитет към водата (мобилната фаза). Това означава, че ще се движи нагоре по хартията с мобилната фаза. Стандарт №2 от друга страна има силен афинитет към хартията. Това означава, че ще остане със стационарната фаза. И накрая, Стандарт # 3 има афинитет както към водата, така и към хартията. Предвиждате, че ще премести междинна сума.
Откривате, че разтворителят се движи с 5,7 cm, докато Standard # 1 се движи с 0,5 cm, Standard # 2 се движи с 4,8 cm, а Standard # 3 с 2,9 cm. Какви са Rе стойности за всеки стандарт?
Сега знаете Rе стойности за стандартите. След това върху друг лист хартия поставяте точка от сместа и оставяте хроматограмата да се развие, като я поставяте във вода.
Веднъж премахнати, установявате, че има две точки, които се отделят от първоначалната точка, която сте поставили. Това вероятно означава, че във вашата смес има само два компонента. След това трябва да разберете на кой от стандартите съответстват тези два компонента. За да направите това, измервате Rе стойности.
Разтворителят се движи 4,5 cm. Единият компонент (наречен компонент 1) се премести с 2,2 cm, а другият се премести с 3,9 cm (наречен компонент 2). За да видите на кой стандарт отговарят тези компоненти, ще трябва да използвате формулата на коефициента на задържане, за да изчислите Rе стойности.
Предвид тези Rе стойности, вероятно компонент 1 съответства на стандарт # 3, тъй като Rе стойностите са много сходни. Компонент 2 вероятно е Стандарт # 2.