علم الأحياء الدقيقة هو دراسة الكائنات الحية الدقيقة: أشكال الحياة أحادية الخلية المجهرية أو بالكاد مرئية مثل البكتيريا ، والعتائق ، والطفيليات وبعض الفطريات ، وحتى بعض النباتات متعددة الخلايا الصغيرة للغاية والحيوانات و الفطريات. يدرس علماء الأحياء الدقيقة أيضًا الظواهر غير العضوية مثل الفيروسات والبريونات وأشباه الفيروسات والفيروسات. "ميكروب" هو مصطلح شامل لجميع هذه الكيانات. العد في علم الأحياء الدقيقة هو تحديد عدد الميكروبات الحية الفردية في العينة ؛ أربع تقنيات أساسية ممكنة.
عد الثقافات
أحد المقاييس المباشرة لتعداد الميكروبات هو عدد الصفائح القياسي ، ويسمى أيضًا العد القابل للتطبيق. من أجل هذا العد ، تزرع عينة عن طريق تخفيفها ، ووضعها على أطباق وسط الثقافة واحتضانها لفترة زمنية محددة. ثم تقوم بعد ذلك بحساب عدد المستعمرات واستخدام هذا الرقم لاستنتاج العدد الأصلي للميكروبات في العينة. من الناحية الفنية ، لا يعطي عدد الصفائح عدد الميكروبات الفردية ، بل يعطي "تكوين المستعمرات" "، لأنك لا تعرف على وجه اليقين ما إذا كانت كل مستعمرة قد أتت بالفعل من ميكروب واحد أم من مجموعة صغيرة من الميكروبات. ومع ذلك ، تعتبر هذه الأرقام دقيقة للغاية لتقدير عدد الميكروبات في العينات الأصلية. العيوب هي أن هذا الاختبار يستهلك الوقت والمساحة ويتطلب معدات متخصصة يجب إعدادها بشكل صحيح.
التهم الفردية
التعداد المجهري المباشر ، والذي يُطلق عليه أيضًا تعداد الخلايا الكلي ، هو شكل آخر من أشكال التعداد المباشر. تقوم أولاً بتقسيم العينة إلى عدد من الغرف المتساوية الحجم. ثم تحدد متوسط عدد الميكروبات لكل حجرة عن طريق عد بعض أو كل الميكروبات تحت المجهر. أخيرًا ، تستخدم هذا المتوسط لحساب الرقم في الوحدة الأصلية. العيب الرئيسي للعد المجهري المباشر هو أنه من الصعب التمييز بين الميكروبات الحية والميتة ، لذلك قد لا تعطي هذه الطريقة تعدادًا دقيقًا وقابل للتطبيق.
أشعة الضوء ، غيوم الميكروبات
اختبارات التعكر هي أشكال من العد غير المباشر. التعكر هو تعكر السائل. في القياس العكسي تضع عينة في المحلول ، تقيس مدى غموض المحلول الجديد عن طريق تسليط الضوء من خلاله باستخدام مقياس الطيف الضوئي ، قم بتقدير عدد الميكروبات الحية اللازمة لإنتاج مستوى الغيوم المرصود. العيب هنا هو أن شخصًا ما يجب أن يكون قد قام بالفعل بالعديد من أعداد الصفائح القياسية للميكروب المعني من أجل عمل نماذج لحلول متفاوتة التعكر ، بحيث يكون لديك معيار لقياس عينتك الحالية ضد. يجب أيضًا أن تحذر من التركيز المفرط لعينتك ، لأن قياس التعكر يكون دقيقًا فقط إذا لم تكن هناك ميكروبات في العينة تمنع أي ميكروبات أخرى. في مقارنة التعكر المرئي ، تقارن تعكر عينتك بتعكر وحدة من نفس الحجم وعدد ميكروبي معروف ، وتقدير تعدادًا بناءً على هذه المقارنة.
النتائج غير المباشرة
هناك نوعان آخران من أشكال التعداد غير المباشر وهما تحديد الكتلة وقياس النشاط الجرثومي. لتعداد تحديد الكتلة ، تقوم بوزن كمية المادة البيولوجية في عينتك ، قارن هذا الوزن إلى منحنى قياسي للتعداد الميكروبي المعروف وتقدير العدد الميكروبي الأصلي من هذا مقارنة. لقياس النشاط الميكروبي ، يمكنك قياس كمية منتج بيولوجي في عينتك ، مثل النفايات الأيضية ، ثم قارن ذلك بمنحنى قياسي للتهم المعروفة وقم بتقدير التعداد الخاص بك من هذا مقارنة.
