كيفية تفسير جل الاغاروز

بمجرد تشغيل عينات الحمض النووي على هلام الاغاروز والتقاط صورة ، يمكنك حفظ الصورة لوقت لاحق ، وعند هذه النقطة يمكنك تحليل النتائج وتفسيرها. ستعتمد أنواع الأشياء التي تبحث عنها على طبيعة تجربتك. إذا كنت تقوم ببصمة الحمض النووي ، على سبيل المثال ، فستحتاج إلى مقارنة حجم قطع الحمض النووي من عينتين - من المشتبه به ومن عينة مسرح الجريمة ، ربما. على النقيض من ذلك ، إذا كنت تعمل مع بلازميدات من البكتيريا ، فقد تحتاج إلى التأكد من احتواء البلازميد على المادة الملحقة. وبالتالي ، ستعتمد طريقة تفسيرك للجيل جزئيًا على التجربة التي أجريتها. ومع ذلك ، هناك بعض القواعد العامة التي يمكنك تطبيقها.

لاحظ أنك قد تحتاج أو لا تحتاج إلى استخدام الإرشادات الواردة في هذا القسم. غالبًا ما يستخدم الاغاروز الكهربائي للهلام لتأكيد أن البلازميد يحتوي على مادة داخلية معينة. إذا كنت لا تعمل مع البلازميدات ، يمكنك تخطي هذا القسم. ومع ذلك ، إذا كنت كذلك ، يمكنك اتباع هذه التعليمات.

لاحظ أنه إذا كنت تعمل باستخدام بلازميدات غير مقطوعة أو مقطوعة ، فلا يمكنك تقدير الحجم باستخدام الإجراء الوارد في القسم 1 أعلاه. ذلك لأن البلازميدات غير المقطوعة والمكسورة تهاجر بمعدلات مختلفة من الحمض النووي الخطي.

قارن عدد النطاقات في كل حارة. تذكر أن إنزيم التقييد يقطع الحمض النووي في المواقع التي يحدث فيها تسلسل معين يسمى موقع التقييد. إذا عولجت العينة باستخدام إنزيمين مقيدين ، فيجب أن يكون كلاهما موجودًا شريطًا للإدخال وشريطًا لبقية البلازميد. ذلك لأن الإدخال سيكون محاطًا بموقعين تقييد ، كل منهما لأنزيم مختلف ، لذا فإن الجروح في كلا الموقعين ستحرر الإدخال من البلازميد. على النقيض من ذلك ، فإن القطع في موقع واحد فقط سيحول البلازميد إلى DNA خطي. يجب أن تحتوي العينة المقطوعة بدون إنزيمات تقييدية أو إنزيم تقييد واحد ، إذن ، على شريط واحد ، بينما يجب أن تحتوي العينة المقطوعة مع إنزيمين مقيدين على شريطين.

ابحث عن العصابات التي تم إنشاؤها بواسطة DNA البلازميد المكسور. يحتوي البلازميد المكسور على قطع في خيط واحد فقط ، لذلك يهاجر بشكل أبطأ من قطع البلازميد. تهاجر البلازميدات المقطوعة بدورها أبطأ من الحمض النووي غير المقطوع.

قدر حجم الملحق باستخدام الإجراء الموضح في القسم 1 وحدد ما إذا كان يطابق توقعاتك (والتي ستختلف اعتمادًا على التجربة.)

الأشياء ستحتاج

  • قلم
  • ورق
  • برنامج جداول البيانات
  • صورة هلام الخاص بك
  • مسطرة
  • يشارك
instagram viewer