تقاوم المحاليل العازلة التغيرات في الأس الهيدروجيني لأنها تحتوي على اتحادات حمضية ضعيفة تعمل على تحييد أيونات H + و OH. تتكون المحاليل العازلة من أحماض أو قواعد ضعيفة وملح ذلك الحمض أو القاعدة. يعتمد اختيار نظام المخزن المؤقت المناسب على نطاق الأس الهيدروجيني للتخزين المؤقت. تحدث معظم التفاعلات البيولوجية في نطاق الأس الهيدروجيني من 6 إلى 8. عازلة الفوسفات على نطاق درجة الحموضة من 6.5 إلى 7.5. تعتبر مخازن حمض الكربوكسيل مفيدة من درجة الحموضة 3 إلى 6. تعمل مخازن بورات من درجة الحموضة 8.5 إلى 10. تعمل مخازن الأحماض الأمينية مثل الجلايسين والهيستيدين على مجموعة متنوعة من نطاقات الأس الهيدروجيني. يعد Tris buffer أحد أكثر أنظمة العازلة استخدامًا في مختبرات الأحياء. سيتم استخدام حسابات محلول Tris المؤقت في المثال التالي ، لكن المنهجية تنطبق على أي محلول عازل.
استخدم ناتج مولارية المحلول النهائي والحجم لتحديد مولات القاعدة المطلوبة. على سبيل المثال ، إذا كانت هناك حاجة إلى 2 لتر من محلول 0.1 M من Tris ، فإن عدد مولات Tris المطلوب هو:
احسب كتلة العازلة المطلوبة بضرب عدد المولات التي يحتاجها الوزن الجزيئي للقاعدة. على سبيل المثال ، كتلة 0.2 مول من قاعدة Tris تساوي:
قم بإذابة القاعدة في الماء المقطر باستخدام قضيب تحريك مغناطيسي وتحريك الصفيحة الساخنة. قم بإذابه في حجم من الماء أقل بقليل من حجم المحلول النهائي (950 إلى 975 مل لكل لتر من المحلول النهائي). يتغير الرقم الهيدروجيني لمخزن Tris مع التركيز ويحتاج إلى إعادة ضبط إذا تم استخدام حجم أولي صغير جدًا. من الأفضل أيضًا تحضير المخزن المؤقت عند نفس درجة الحرارة التي سيتم استخدامه أثناء الفحص أو التجربة حيث أن Tris لها تغييرات كبيرة تعتمد على درجة الحرارة في درجة الحموضة.
نصائح
- لتوفير الوقت عند تحضير محلول منظم ، يمكنك استخدام مركزات المخزن المؤقت المعدة مسبقًا عند درجة الحموضة المطلوبة وتخفيف المولارية والحجم المطلوبين. قم بإعداد محلول عازل بنفس درجة الحرارة التي سيتم استخدامها لتجنب تغيرات كبيرة في درجة الحموضة. تجنب تعديلات الأس الهيدروجيني التي تستغرق وقتًا طويلاً ، ولا تعاير إلا بعد التخفيف إلى التركيز المطلوب. سيؤدي الذوبان في حجم صغير جدًا إلى تكرار المعايرة.
تحذيرات
- توخى الحذر عند التعامل مع الأحماض والقواعد. ارتدِ نظارات واقية.
عن المؤلف
كارلا بوليان عالمة أحياء تطورية من خلال التدريب وكاتبة مستقلة بشغف. بالإضافة إلى الكتابة في Demand Studios و eHow ، فهي كاتبة مميزة في Parenting a Gifted Child في Suite101.com. إنها مثيرة في استكشاف مواضيع جديدة من خلال البحث المكثف.
اعتمادات الصورة
الصورة مقدمة من إيمي ب. @ morgueFile.com