Хіміки використовують високоефективну рідинну хроматографію (ВЕРХ) для розділення сумішей сполук. Загалом, спосіб полягає у введенні зразка в колонку, де вона змішується з одним або кількома розчинниками. Різні сполуки в різній мірі адсорбуються або «прилипають» до колонки; і коли розчинник виштовхує сполуки через колонку, один із компонентів суміші першим вийде з колони. Прилад виявляє сполуки, коли вони виходять із колони, і виробляє хроматограму, яка складається з діаграми з часом утримання на осі x та інтенсивністю сигналу від детектора на осі y. Коли сполуки виходять із колонки, вони виробляють «піки» на хроматограмі. Загалом, чим далі один від одного і чим вужчі піки на хроматограмі, тим вища роздільна здатність. Вчені вважають роздільну здатність 1,0 або вище для адекватного розділення.
Виміряйте ширину двох сусідніх піків на хроматограмі, зазначивши, де значення осі х знаходяться в основі кожного піку. Вісь х представляє час утримання, який зазвичай вимірюється в секундах. Таким чином, якщо пік починається через 15,1 секунди і закінчується через 18,5 секунди, його ширина становить (18,5 - 15,1) = 3,4 секунди.
Визначте час утримання, відмітивши час, тобто розташування на осі х, яке відповідає розташуванню максимумів піків. Зазвичай це значення буде приблизно на півдорозі між двома значеннями, використовуваними для обчислення ширини на кроці 1. Наприклад, приклад, наведений на кроці 1, мав би проявляти максимум приблизно 16,8 секунди.
Обчисліть роздільну здатність R між двома піками за:
R = \ frac {RT_1-RT_2} {0,5 (Ш_1 + Ш_2)}
де RT1 та RT2 являють собою часи утримання піків 1 і 2 і W1 і W2 представляють ширину піків, взятих за їх основи. Продовжуючи приклад із кроків 2 і 3, один пік демонструє час утримання 16,8 секунди і ширину 3,4 секунди. Якби другий пік мав час утримання 21,4 секунди при ширині 3,6 секунди, тоді роздільна здатність мала б бути:
R = \ frac {21,4-16,8} {0,5 (3,4 + 3,6)} = 1,3
Речі, які вам знадобляться
- ВЕРХ хроматограма
- Калькулятор