Методи ізоляції для смугової пластини

Хоча їх не можна побачити неозброєним оком, бактерії є скрізь. Вони існують в їжі, ґрунті, воді, на поверхнях наших будинків, а також у нашому тілі та на ньому. Бактерії, як правило, існують у змішаних популяціях. Виділення конкретної бактерії з інших видів бактерій у даній пробі дозволяє мікробіологам вивчити її структуру та функції, характеристики, що використовуються при її ідентифікації. Мікробіологи часто виділяють бактерії, використовуючи один із декількох методів прожилки.

Інструменти

Інокуляційна петля використовується для перенесення мікроорганізмів. Він складається з ніхромового або платинового дроту з невеликою круглою петлею на одному кінці. Інший кінець прямий і засувається в ручку. Також доступні пластикові одноразові прищеплювальні петлі. Виділити бактерії можна лише за умови їх зростання. Мікробіологи вирощують бактерії для ізоляції смугових пластинок у неглибоких круглих чашках Петрі, наповнених твердим середовищем, званим агаром. Агар імітує середовище, в якому бактерії природно ростуть. Наповнений носіями посуд стерильний та закритий кришкою для запобігання росту небажаних організмів. Під час ізоляції смугової пластини петлю інокуляції неодноразово стерилізують у полум’ї пальника Бунзена.

Принцип

Техніка пластинчастих пластин є найпопулярнішим методом виділення конкретних бактерій із зразка, що містить суміш мікроорганізмів. Методика істотно розріджує кількість організмів і зменшує їх щільність. Це дозволяє мікробіологам розрізняти та виділяти окремі колонії бактерій. Колонія - це видиме скупчення бактерій. Усі бактерії в одній колонії походять з однієї і тієї ж бактеріальної клітини. Отже, окремі колонії є «чистими» колоніями. Чиста колонія переноситься на іншу пластину для отримання чистої культури, що складається з одного виду бактерій.

Процедура

При правильному виконанні ізоляція смугової пластинки стоншує зразок і дає можливість окремим бактеріальним клітинам розвиватися в ізольовані колонії. Мікробіолог починає зі стерилізації щеплення в полум’ї. Вона охолоджує петлю, торкаючись її до агару, потім занурює петлю у зразок і розподіляє її вперед-назад, щоб покрити ділянку пластини. Вона стерилізує петлю, охолоджує її і прищеплює другу, сусідню ділянку пластини, перетягуванням петлю через першу секцію кілька разів і охоплюючи другу секцію зигзагом руху. Це забирає невелику кількість бактерій з першого відділу і переносить їх у другий відділ. Кількість повторень цієї основної процедури залежить від використовуваного методу мелірування. Незважаючи на метод, оригінальний зразок використовується для інокуляції лише першої ділянки пластини.

Метод штрихової пластини

Методи мелірування пластин різняться залежно від кількості агарових зрізів. Метод Т-смужки використовує три секції: верхню половину та дві однакові за розміром нижні секції. Початковий посівний матеріал поміщають у верхню половину пластини. Бактерії перетягуються з верхньої секції в одну з нижніх секцій, потім з цієї нижньої секції в іншу. У методі квадранта чотири однакові за розміром ділянки прожилки. Метод безперервної мелірування зазвичай включає посів верхньої половини пластини, обертання її на 180 градусів, і щеплення другої половини пластини без стерилізації петлі або перетягування бактерій з попередньої розділ.

  • Поділитися
instagram viewer