Tampon çözeltiler, H+ ve OH- iyonlarını nötralize eden zayıf asit-baz konjugatları içerdiklerinden pH'daki değişikliklere direnirler. Tampon çözeltiler, zayıf asit veya bazlardan ve bu asit veya bazın tuzundan oluşur. Uygun bir tampon sisteminin seçimi, tamponlama için pH aralığına bağlıdır. Çoğu biyolojik reaksiyon 6 ila 8 pH aralığında gerçekleşir. Fosfat tamponları, 6,5 ila 7,5 pH aralığında tamponlanır. Karboksilik asit tamponları pH 3 ila 6 arasında faydalıdır. Borat tamponları pH 8.5 ila 10 arasında işlev görür. Glisin ve histidin gibi amino asit tamponları, çeşitli pH aralıklarında performans gösterir. Tris tamponu, biyoloji laboratuvarlarında en yaygın olarak kullanılan tampon sistemlerinden biridir. Aşağıdaki örnekte bir Tris tampon solüsyonu için hesaplamalar kullanılacaktır, ancak metodoloji herhangi bir tampon solüsyon için geçerlidir.
Gerekli baz molünü belirlemek için nihai çözelti molaritesinin ve hacminin ürününü kullanın. Örneğin, 2 litre 0.1 M Tris tampon çözeltisi gerekiyorsa, gereken Tris mol sayısı:
Gereken mol sayısını bazın moleküler ağırlığıyla çarparak gereken tampon kütlesini hesaplayın. Örneğin, 0.2 mol Tris bazının kütlesi şuna eşittir:
Manyetik bir karıştırma çubuğu ve karıştırarak sıcak plaka kullanarak bazı damıtılmış suda çözün. Nihai çözelti hacminden (nihai çözeltinin her litresi için 950 ila 975 mL) yalnızca biraz daha az bir su hacminde çözün. Tris tamponunun pH'ı konsantrasyonla değişir ve çok küçük bir başlangıç hacmi kullanılırsa yeniden ayarlanması gerekir. Tris pH'ta sıcaklığa bağlı büyük değişikliklere sahip olduğundan, tamponu tahlil veya deney sırasında kullanılacağı sıcaklıkta hazırlamak da en iyisidir.
İpuçları
- Bir tampon solüsyonu hazırlarken zamandan tasarruf etmek için, istenen molarite ve hacim için gerekli pH'ta ve seyreltide hazır tampon konsantreleri kullanabilirsiniz. Önemli pH değişikliklerinden kaçınmak için kullanılacağı sıcaklıkta tampon çözeltisi hazırlayın. Zaman alıcı pH ayarlamalarından kaçının, sadece istenen konsantrasyona seyreltildikten sonra titre edin. Çok küçük bir hacimde çözme, tekrarlanan titrasyonlara yol açacaktır.
Uyarılar
- Asitleri ve bazları tutarken dikkatli olun. Koruyucu gözlük takın.
yazar hakkında
Carla Boulianne, eğitimli bir evrim biyoloğu ve tutkuyla serbest yazar. Demand Studios ve eHow için yazmanın yanı sıra Suite101.com'da Parenting a Gifted Child'ın uzun metrajlı yazarıdır. Kapsamlı araştırmalar yoluyla yeni konuları keşfetmekten heyecan duyar.
Fotoğrafa katkı verenler
Fotoğraf Emmi P.'nin izniyle @morgueFile.com
