วิธีการคำนวณความเข้มข้นของเซลล์

นักวิทยาศาสตร์และช่างเทคนิคมักจะต้องคำนวณความเข้มข้นของเซลล์ในสารแขวนลอย ตัวอย่างเช่น เมื่อผู้ป่วยไปเจาะเลือดที่ห้องทำงานของแพทย์ ห้องปฏิบัติการสามารถใช้วิธีการบางอย่างเพื่อค้นหาปริมาณเซลล์เม็ดเลือดขาวในเลือดในปริมาณที่กำหนด ข้อมูลนี้ช่วยให้แพทย์ทราบข้อมูลมากมายเกี่ยวกับสุขภาพของผู้ป่วย โดยเฉพาะระบบภูมิคุ้มกันของเขา และไม่ว่าเขาจะต่อสู้กับการติดเชื้อหรือเจ็บป่วยอื่นๆ การทดสอบในลักษณะนี้สามารถค้นหาเซลล์อื่นๆ ในเลือด รวมทั้งน้ำไขสันหลังและของเหลวในร่างกายอื่นๆ เช่น จำนวนเซลล์อสุจิในน้ำอสุจิเพื่อการเจริญพันธุ์ นักวิทยาศาสตร์ยังคำนวณความเข้มข้นของเซลล์ของแบคทีเรีย ยีสต์ และจุลินทรีย์อื่นๆ เพื่อวัตถุประสงค์มากมาย ตั้งแต่การวิจัยทางนิเวศวิทยาไปจนถึงเทคโนโลยีทางอุตสาหกรรม หนึ่งในเทคนิคที่พบบ่อยที่สุดได้รับการสอนในชั้นเรียนชีววิทยาของวิทยาลัยหลายแห่ง และใช้อุปกรณ์ที่เรียกว่าห้องนับจำนวน

ก่อนที่สารแขวนลอยของเซลล์จะเข้าไปในห้องนับได้ อาจมีการเจือจางเนื่องจากอาจมีเซลล์เป็นพันหรือหลายล้านเซลล์ ในกรณีนั้น เซลล์ไม่สามารถนับได้อย่างสมเหตุสมผล ในการเจือจางตัวอย่าง ให้ใช้ปิเปตที่ปราศจากเชื้อเพื่อใส่สารละลายเซลล์สิบไมโครลิตรลงในหลอดทดลองที่มีสารเจือจาง 90 ไมโครลิตร ชนิดของสารเจือจางจะขึ้นอยู่กับชนิดของเซลล์ ผสมให้เข้ากัน สารละลายนี้ถูกเจือจางมากกว่าตัวอย่างเริ่มต้นสิบเท่า ดังนั้นปัจจัยการเจือจางของมันคือ 10

instagram story viewer
-1. ติดฉลากไว้ ทำซ้ำหลายๆ ครั้ง โดยใช้ปิเปตที่ปราศจากเชื้อในแต่ละครั้ง จนกว่าสารละลายจะเจือจางเพียงพอ หากคุณเจือจางครั้งที่สอง หลอดทดลองที่สองจะเจือจางมากกว่าสารละลายตั้งต้น 100 เท่า ดังนั้นปัจจัยการเจือจางจึงเท่ากับ 10-2 และอื่นๆ

คุณอาจต้องลองเจือจางหลายๆ ครั้งเพื่อหาปัจจัยการเจือจางที่ถูกต้องสำหรับห้องตรวจนับ โดยทั่วไปแล้ว ห้องนับจำนวนจะเป็นกล่องสี่เหลี่ยมเล็กๆ ใสๆ ที่มีความลึกที่แม่นยำและมีตารางที่แม่นยำที่จารึกไว้ด้านบน เป็นที่รู้จักกันว่าฮีโมไซโตมิเตอร์หรือบางครั้งก็เป็นฮีมาไซโตมิเตอร์ จุดมุ่งหมายคือเพื่อให้ระบบกันกระเทือนเจือจางเพียงพอเมื่อดูในห้องตรวจนับ จะไม่มีเซลล์เหลื่อมกัน และกระจายไปทั่วตารางในลักษณะที่สม่ำเสมอ ปิเปตสารแขวนลอยที่เจือจางซึ่งมีเซลล์เข้าไปในบ่อน้ำในห้องตรวจนับ ซึ่งจะตกลงสู่ห้องกริดผ่านการกระทำของเส้นเลือดฝอย วางห้องนับจำนวนบนแท่นกล้องจุลทรรศน์แล้วดูโดยใช้พลังงานต่ำ

ตารางประกอบด้วยสี่เหลี่ยมซึ่งทำจากสี่เหลี่ยมที่เล็กกว่า เลือกสี่เหลี่ยมจัตุรัสประมาณสี่หรือห้าช่อง หรือจำนวนเท่าใดก็ได้ที่คุณต้องการนับอย่างน้อย 100 เซลล์ ในรูปแบบที่คุณเลือก เช่น มุมทั้งสี่และสี่เหลี่ยมจัตุรัสตรงกลาง ถ้าเซลล์มีขนาดใหญ่ เซลล์เหล่านี้อาจเป็นช่องสี่เหลี่ยมขนาดใหญ่ แต่ถ้าเซลล์มีขนาดเล็ก คุณอาจเลือกช่องสี่เหลี่ยมที่เล็กกว่าแทน

ปริมาตรจำเพาะของตารางกริดแต่ละตารางอาจแตกต่างกันไปตามผู้ผลิตห้องนับ แต่บ่อยครั้งที่ความลึกของห้องเป็น0.1 มิลลิเมตร พื้นที่สี่เหลี่ยมขนาดใหญ่ 1 ตารางมิลลิเมตร และพื้นที่สี่เหลี่ยมเล็ก ๆ เท่ากับ 0.04 ตารางกิโลเมตร มิลลิเมตร สี่เหลี่ยมที่ใหญ่กว่าจะมีปริมาตร 0.1 ลูกบาศก์มิลลิเมตร สำหรับตัวอย่างนี้ สมมติว่าคุณนับจำนวนเซลล์ทั้งหมด 103 เซลล์ในห้าช่องสี่เหลี่ยม และคุณเจือจางตัวอย่างเริ่มต้นจนกระทั่งปัจจัยการเจือจางเท่ากับ 10-2.

หากตารางกริดแต่ละตารางมีปริมาตร 0.1 ลูกบาศก์มิลลิเมตร และนับได้ 5 อัน ปริมาตรรวมของห้องที่นับคือ 0.5 ลูกบาศก์มิลลิเมตร และมี 103 เซลล์ เพิ่มเป็นสองเท่าเพื่อให้ได้ 1 ลูกบาศก์มิลลิเมตรจะทำให้เป็น 206 เซลล์ หนึ่งลูกบาศก์เซนติเมตรเทียบเท่ากับ 1 มิลลิลิตร ซึ่งเป็นการวัดที่มีประโยชน์สำหรับของเหลว มี 1,000 ลูกบาศก์มิลลิเมตรในลูกบาศก์เซนติเมตร ดังนั้น ถ้ามีสารแขวนลอยหนึ่งลูกบาศก์เซนติเมตรหรือหนึ่งมิลลิลิตร คุณจะนับได้ 206,000 (206 x 1,000) เซลล์ นี่คือสิ่งที่ดูเหมือนเป็นสมการ:

ปริมาตรของตารางกริด x จำนวนสี่เหลี่ยมที่นับ = ปริมาณรวมของการระงับที่นับ

จำนวนเซลล์ ÷ ปริมาตรของสารแขวนลอยที่นับได้ = จำนวนเซลล์ต่อลูกบาศก์มิลลิเมตร

จำนวนเซลล์ต่อมิลลิเมตร ลูกบาศก์ x 1000 = จำนวนเซลล์ต่อมิลลิลิตร

คุณจะต้องคำนึงถึงการเจือจางใดๆ ที่ทำขึ้นเพื่อทำให้สารละลายเริ่มต้นสามารถนับได้ภายใต้กล้องจุลทรรศน์ ในตัวอย่างนี้ ปัจจัยการเจือจางคือ 10 is-2. ในการคำนวณความเข้มข้นเริ่มต้นของสารละลาย:

จำนวนเซลล์ต่อมิลลิลิตร ÷ ปัจจัยการเจือจาง = ความเข้มข้นของเซลล์

สำหรับตัวอย่างนี้ จำนวนเซลล์ต่อมิลลิลิตรคือ 206,000 และหารด้วย 10-2 (0.01) ให้ความเข้มข้นของเซลล์ 20,600,000 เซลล์ต่อมิลลิลิตรในตัวอย่างเริ่มต้น

Teachs.ru
  • แบ่งปัน
instagram viewer