การแจงนับในจุลชีววิทยาคืออะไร?

จุลชีววิทยาคือการศึกษาจุลินทรีย์: จุลชีววิทยาหรือสิ่งมีชีวิตเซลล์เดียวที่มองไม่เห็นเช่น แบคทีเรีย อาร์เคีย โปรโตซัวและเชื้อราบางชนิด และแม้แต่พืชหลายเซลล์ขนาดเล็กมาก สัตว์และ เชื้อรา นักจุลชีววิทยายังศึกษาปรากฏการณ์ที่ไม่ใช่สิ่งมีชีวิตที่เหมือนจริง เช่น ไวรัส พรีออน ไวรอยด์ และไวเรียน "จุลชีพ" เป็นคำศัพท์เฉพาะสำหรับหน่วยงานเหล่านี้ทั้งหมด การแจงนับในจุลชีววิทยาคือการกำหนดจำนวนจุลินทรีย์ที่มีชีวิตในตัวอย่าง สี่เทคนิคพื้นฐานที่เป็นไปได้

การวัดโดยตรงอย่างหนึ่งสำหรับการแจงนับจุลินทรีย์คือการนับเพลตมาตรฐาน หรือที่เรียกว่าการนับที่มีชีวิต ในการนับจำนวนนี้ คุณเพาะเลี้ยงตัวอย่างโดยการเจือจาง วางบนจานของอาหารเลี้ยงเชื้อและฟักไข่ตามระยะเวลาที่กำหนด จากนั้นคุณนับจำนวนโคโลนีและใช้ตัวเลขนี้ในการอนุมานจำนวนจุลินทรีย์ในตัวอย่างเดิม ในทางเทคนิค การนับจานไม่ได้ระบุจำนวนจุลินทรีย์แต่ละตัว แต่เป็นการ "สร้างอาณานิคม" หน่วย" เพราะคุณไม่รู้แน่ชัดว่าแต่ละอาณานิคมมาจากจุลินทรีย์ตัวเดียวหรือจากกลุ่มเล็ก ๆ จุลินทรีย์ อย่างไรก็ตาม การนับเหล่านี้ถือว่าแม่นยำมากสำหรับการประมาณจำนวนจุลินทรีย์ในตัวอย่างดั้งเดิม ข้อเสียคือการทดสอบนี้ใช้เวลาและพื้นที่มาก และต้องใช้อุปกรณ์พิเศษที่ต้องเตรียมอย่างถูกต้อง

การนับด้วยกล้องจุลทรรศน์โดยตรงหรือที่เรียกว่าจำนวนเซลล์ทั้งหมดเป็นอีกรูปแบบหนึ่งของการแจงนับโดยตรง ขั้นแรก คุณแบ่งตัวอย่างออกเป็นห้องขนาดเท่ากันจำนวนหนึ่ง จากนั้นคุณกำหนดจำนวนจุลินทรีย์เฉลี่ยต่อห้องเพาะเลี้ยงโดยการนับบางส่วนหรือทั้งหมดภายใต้กล้องจุลทรรศน์ สุดท้ายคุณใช้ค่าเฉลี่ยนี้เพื่อคำนวณตัวเลขในหน่วยเดิม ข้อเสียเปรียบที่สำคัญสำหรับการนับด้วยกล้องจุลทรรศน์โดยตรงคือการแยกแยะจุลินทรีย์ที่มีชีวิตออกจากจุลินทรีย์ที่ตายแล้วได้ยาก ดังนั้นวิธีนี้จึงอาจไม่ให้การแจงนับที่ถูกต้องแม่นยำ

การทดสอบความขุ่นเป็นรูปแบบของการแจงนับทางอ้อม ความขุ่นคือความขุ่นของของเหลว ในการวัดค่าความขุ่น คุณใส่ตัวอย่างในสารละลาย วัดความขุ่นของสารละลายใหม่โดยการส่องแสงผ่านมัน ด้วยสเปกโตรโฟโตมิเตอร์ จากนั้นจึงประมาณจำนวนจุลินทรีย์ที่มีชีวิตซึ่งต้องใช้เพื่อสร้างระดับความขุ่นที่สังเกตได้ ข้อเสียของที่นี่คือต้องมีคนทำการนับจำนวนจุลินทรีย์ที่เป็นปัญหาในเพลตมาตรฐานมาแล้วหลายครั้ง เพื่อผลิตสารละลายตัวอย่างที่มีความขุ่นต่างกัน เพื่อให้คุณมีมาตรฐานในการวัดตัวอย่างปัจจุบันของคุณ ต่อต้าน. นอกจากนี้ คุณต้องระมัดระวังในการทำให้ตัวอย่างของคุณมีความเข้มข้นมากเกินไป เนื่องจากการนับความขุ่นจะแม่นยำก็ต่อเมื่อไม่มีจุลชีพในตัวอย่างใดปิดกั้นสิ่งอื่นๆ ในการเปรียบเทียบความขุ่นที่มองเห็นได้ คุณเปรียบเทียบความขุ่นของตัวอย่างกับความขุ่นของหน่วยที่มีขนาดเท่ากันและจำนวนจุลินทรีย์ที่ทราบ และประมาณการแจงนับตามการเปรียบเทียบนี้

รูปแบบการแจงนับทางอ้อมอีกสองรูปแบบคือการกำหนดมวลและการวัดฤทธิ์ของจุลินทรีย์ สำหรับการแจงนับมวล คุณชั่งน้ำหนักปริมาณของสารชีวภาพในตัวอย่างของคุณ เปรียบเทียบสิ่งนี้ ให้น้ำหนักเป็นเส้นโค้งมาตรฐานสำหรับการนับจุลินทรีย์ที่ทราบและประมาณการจำนวนจุลินทรีย์ดั้งเดิมจากสิ่งนี้ การเปรียบเทียบ สำหรับการวัดกิจกรรมของจุลินทรีย์ คุณวัดปริมาณของผลิตภัณฑ์ทางชีวภาพในตัวอย่างของคุณ เช่น ของเสียจากการเผาผลาญแล้วเปรียบเทียบสิ่งนี้กับกราฟมาตรฐานสำหรับการนับที่ทราบและประมาณการแจงนับของคุณจากสิ่งนี้ การเปรียบเทียบ