วิธีการคำนวณ Titers ไวรัส

การคำนวณ titer สำหรับไวรัสเป็นวิธีที่ซับซ้อนในการบอกว่านักวิทยาศาสตร์กำลังนับจำนวนไวรัสในกลุ่มตัวอย่าง ในการคำนวณไทเทอร์ของไวรัส นักวิทยาศาสตร์ติดแผ่นแบคทีเรียที่กำลังเติบโตด้วยสารละลายไวรัสที่ความเข้มข้นต่างๆ และ หาจำนวนไวรัสในสารละลายเดิมโดยการนับแบคทีเรียที่เสียชีวิตเนื่องจากไวรัส การติดเชื้อ

ใส่ถุงมือ เติม 10 หลอดเพาะกับน้ำซุป 9 มล. แล้วติดป้ายว่า “10^-1,” “10^-2”, “10^-3” และ จนถึง “10^-10” หลอดเหล่านี้จะถูกใช้สำหรับการเจือจางแบบอนุกรมของไวรัสที่ใช้ในการคำนวณฟาจ ไทเตอร์ เนื่องจากไวรัสสามารถเติบโตในระดับความเข้มข้นสูงอย่างเหลือเชื่อ คุณจึงต้องเจือจางไวรัสเหล่านี้เพื่อนับจำนวนอย่างมีประสิทธิภาพ แต่ละหลอดแสดงถึงการเจือจางของไวรัสสิบเท่า

นำวัฒนธรรมผสม 1 มล. จากหลอดของคุณที่มีข้อความว่า “10^-1” และถ่ายโอนด้วยปิเปตใหม่ไปยังหลอดถัดไปที่ระบุว่า “10^-2” ผสมหลอดนี้ด้วย

ทำต่อตามรูปแบบนี้เพื่อสร้างอนุกรมการเจือจางแบบอนุกรม คุณจะจบลงด้วย 9 หลอด 9 มล. และ 1 หลอด 10 มล. ปริมาณไวรัสในหลอดของคุณจะเจือจางตั้งแต่ 10 เท่า (หลอดแรกของคุณ) หรือ 100 เท่า (หลอดที่สองของคุณ) ถึงหมื่นล้านเท่า (หลอดสุดท้ายของคุณ)

ใส่แบคทีเรีย 2 หยดลงในวุ้นของคุณแล้วคลุกเคล้าให้เข้ากัน สิ่งเหล่านี้คือแบคทีเรียที่จะถูกฆ่า ทำให้คุณสามารถนับจำนวนอนุภาคไวรัสในสารละลายเฉพาะได้

เพิ่ม 1 มล. ของการเจือจางแบบอนุกรมแต่ละครั้งลงในหลอดอาหารวุ้นที่เกี่ยวข้องในขณะที่หลอดยังคงอยู่ในอ่างน้ำร้อน ตัวอย่างเช่น 1 มล. ของการเจือจางแบบอนุกรม 10^-1 ของคุณควรเข้าไปในหลอดอาหารที่มีข้อความว่า “10^-1”

ผสมแต่ละหลอดแล้วเทหลอดแต่ละหลอดลงในจานเพาะเชื้อด้วยฉลากที่สอดคล้องกัน สิ่งนี้จะสร้างวุ้นชั้นบาง ๆ ที่ฉีดเชื้อแบคทีเรียและไวรัสในแต่ละจาน ปล่อยให้จานเติบโตในชั่วข้ามคืนในตู้ฟัก

นำจานของคุณออกจากตู้ฟักแล้วตรวจสอบ คุณควรเห็นบริเวณที่มีเมฆมากทั่วทั้งจานที่มีแบคทีเรียเติบโต ยกเว้นจุดใสเล็กๆ ที่เรียกว่าคราบจุลินทรีย์ แผ่นโลหะเหล่านี้เป็นหย่อมของแบคทีเรียที่ตายแล้ว และแผ่นโลหะแต่ละแผ่นแสดงถึงไวรัสตัวเดียว

ใส่จำนวนแผ่นโลหะบนจานของคุณแล้วคูณด้วย 10 ถ้านับได้ 157 โล่ จะได้ 1570

คูณจำนวนที่คุณได้รับในขั้นตอนก่อนหน้าด้วยค่าผกผันของตัวเลขบนหลอดเจือจางของคุณ ตัวอย่างเช่น หากจานที่คุณเลือกคือจาน 10^-5 คุณจะต้องคูณ 1570 ด้วย 10^5 เพื่อให้ได้ 157000000 หมายเลขสุดท้ายนี้คือ phage titer ของคุณและแสดงถึงจำนวนไวรัสต่อมิลลิลิตรของวัฒนธรรมดั้งเดิมของคุณ

  • แบ่งปัน
instagram viewer