วุ้นสารอาหารเป็นอาหารประเภทที่ซับซ้อนสำหรับวัตถุประสงค์ทั่วไปที่ใช้เป็นหลักในการเพาะเลี้ยงจุลินทรีย์หลากหลายชนิด
สื่อที่ซับซ้อน จุลชีววิทยา พูดคือสื่อการเจริญเติบโตที่ประกอบด้วยช่วงของสารอาหารที่มีอยู่และโมเลกุลโปรตีนในระดับความเข้มข้นที่ไม่ทราบ วุ้นสารอาหารใช้เพาะเชื้อจุลินทรีย์ที่ไม่จุกจิก เช่น แบคทีเรียและยีสต์
สิ่งที่เติบโตบนวุ้นสารอาหาร?
จุลินทรีย์ต้องการอาหาร น้ำ และสภาพแวดล้อมที่เหมาะสมเพื่อให้อยู่รอดและเติบโต วุ้นสารอาหาร จัดหาทรัพยากรเหล่านี้สำหรับจุลินทรีย์หลายประเภทจาก เชื้อรา เช่นยีสต์และเชื้อราต่อแบคทีเรียทั่วไปเช่น สเตรปโทคอกคัส และ Staphylococcus.
จุลินทรีย์ที่สามารถปลูกได้ในอาหารเลี้ยงเชื้อที่ซับซ้อน เช่น วุ้นสารอาหาร สามารถอธิบายได้ดังนี้ สิ่งมีชีวิตที่ไม่จุกจิก. สิ่งมีชีวิตที่ไม่จุกจิกคือจุลชีพที่สามารถเติบโตและเจริญเติบโตได้โดยไม่มีสภาวะทางโภชนาการหรือสภาพแวดล้อมพิเศษ
แบคทีเรียบางชนิดไม่สามารถปลูกด้วยสารอาหารจากวุ้น สิ่งมีชีวิตจุกจิก (แบคทีเรียจู้จี้จุกจิก) อาจต้องการแหล่งอาหารที่เฉพาะเจาะจงมากซึ่งไม่ได้จัดเตรียมไว้ในวุ้นสารอาหาร ตัวอย่างหนึ่งของสิ่งมีชีวิตจู้จี้จุกจิกคือ
วุ้นสารอาหารสามารถใช้เพาะเชื้อจุลินทรีย์ได้หลายวัตถุประสงค์ การใช้งานอย่างหนึ่งคือการเพาะปลูกและการบำรุงรักษาอาณานิคมเฉพาะของสิ่งมีชีวิตที่ไม่จุกจิกเพื่อการศึกษาทางวิทยาศาสตร์หรือการระบุ อีกวิธีหนึ่งคือการตรวจจับและวัดปริมาณการมีอยู่ของสารที่อาจเป็นอันตราย แบคทีเรีย หรือจุลินทรีย์อื่นๆ ในน้ำ สิ่งปฏิกูล หอย เนื้อสัตว์ ผลิตภัณฑ์จากนม และผลิตภัณฑ์อาหารอื่นๆ
สื่อต้องปลอดเชื้อเพื่อให้แน่ใจว่าจุลินทรีย์ที่เติบโตเท่านั้นเป็นจุลินทรีย์ที่มีไว้สำหรับการเพาะเลี้ยง และไม่เติบโตเนื่องจากการปนเปื้อนของอาหาร
ส่วนผสมสารอาหารวุ้น
หลัก ส่วนผสมในวุ้นสารอาหาร ได้แก่ เปปโตน สารสกัดจากเนื้อ และวุ้น ส่วนผสมเหล่านี้เป็นผงแล้วเติมลงในน้ำกลั่น องค์ประกอบเฉพาะของสารอาหาร วุ้น อาจแตกต่างกันเล็กน้อยขึ้นอยู่กับผู้ผลิตและแหล่งที่มาของส่วนผสมที่ใช้
องค์ประกอบของอาหารเลี้ยงเชื้อที่เตรียมไว้คือเปปโทน 0.5 เปอร์เซ็นต์ สารสกัดจากเนื้อวัว 0.3 เปอร์เซ็นต์ (หรือสารสกัดจากยีสต์) วุ้น 1.5 เปอร์เซ็นต์ และโซเดียมคลอไรด์ 0.5 เปอร์เซ็นต์
เพื่อกำหนดวุ้น
ในการกำหนดวุ้น ให้นึกถึงคาร์โบไฮเดรตเชิงซ้อนที่มาจากสาหร่ายสีแดงในทะเลซึ่งทำหน้าที่เป็นตัวช่วยแข็งตัวในอาหาร ไม่มีคุณค่าทางโภชนาการสำหรับจุลินทรีย์ที่จะเพาะเลี้ยง
เจลวุ้นที่อุณหภูมิ 113 องศาฟาเรนไฮต์ (45 องศาเซลเซียส) และละลายที่ 203 องศาฟาเรนไฮต์ (95 องศาเซลเซียส) วุ้นยังรวมถึงอาหารเกรดต่างๆ ที่สามารถใช้เป็นส่วนผสมที่ทำให้ข้นสำหรับซุป เยลลี่ และอาหารอื่นๆ
Peptone นิยามtone
นิยามของเปปโตน เป็นโปรตีนที่ละลายน้ำได้ที่เกิดขึ้นในระยะแรกของการสลายโปรตีนระหว่างกระบวนการย่อยอาหาร ผลิตจากวัสดุโปรตีนย่อยบางส่วน เช่น เนื้อสัตว์ เจลาติน และเคซีน โดยใช้กรดหรือ เอนไซม์.
จุดประสงค์ของเปปโตนในอาหารเลี้ยงเชื้อคือเพื่อให้เป็นแหล่งหลักของไนโตรเจนอินทรีย์สำหรับการเพาะเลี้ยงจุลินทรีย์ และยังเป็นแหล่งของคาร์โบไฮเดรตและวิตามิน องค์ประกอบที่แน่นอนของเปปโตนในอาหารเลี้ยงเชื้อจะแตกต่างกันไปขึ้นอยู่กับแหล่งโปรตีนและวิธีการย่อยอาหาร
สารสกัดจากเนื้อ
สารสกัดจากเนื้อ ใช้ทำสารอาหารวุ้นเป็นส่วนผสมของอนุภาคที่ละลายน้ำได้ของเนื้อเยื่อสัตว์ คาร์โบไฮเดรต สารประกอบไนโตรเจนอินทรีย์ วิตามิน และเกลือ
สารสกัดจากยีสต์สามารถใช้ทำวุ้นสารอาหารและให้สารประกอบที่คล้ายคลึงกันได้ จุดประสงค์ของสารประกอบในสารสกัดจากเนื้อวัวคือเพื่อช่วยในการเจริญเติบโตของแบคทีเรียที่ถูกเพาะเลี้ยงบนอาหารเลี้ยงเชื้อที่เป็นสารอาหาร
น้ำกลั่น
น้ำกลั่น มักใช้ทำเป็นอาหารเลี้ยงเชื้อวุ้น. น้ำกลั่นคือน้ำที่ผ่านการแปรรูปเพื่อขจัดสิ่งปนเปื้อนและแร่ธาตุที่ละลายอยู่
น้ำกลั่นที่มีอยู่ในอาหารเลี้ยงเชื้อวุ้นเป็นสิ่งจำเป็นสำหรับกระบวนการชีวิตของจุลินทรีย์ที่เติบโตที่นั่น เช่นเดียวกับน้ำเป็นสิ่งจำเป็นสำหรับกระบวนการชีวิตของสิ่งมีชีวิตทั้งหมด การเติมโซเดียมคลอไรด์ลงในส่วนผสมทำให้สภาพแวดล้อมในการเพาะเลี้ยงคล้ายกับ ไซโตพลาสซึม.
การเตรียมวุ้นสารอาหารปานกลาง
เพื่อให้ถูกต้อง เตรียมส่วนผสมสารอาหารวุ้น สำหรับการเพาะเชื้อแบคทีเรีย สิ่งสำคัญคือต้องอ้างอิงถึงคำแนะนำเฉพาะจากผู้ผลิตสารอาหาร ส่วนผสมหรือปริมาณบางอย่างอาจแตกต่างกันเล็กน้อยขึ้นอยู่กับแหล่งที่มาของสารอาหารวุ้น
- ละลายผงวุ้นสารอาหาร 28 กรัมในน้ำกลั่นหนึ่งลิตร
- อุ่นส่วนผสมให้เดือด ต้มต่อไปและคนส่วนผสมประมาณหนึ่งนาทีหรือจนผงทั้งหมดละลาย
- นึ่งส่วนผสมที่ละลายแล้วเป็นเวลา 15 นาทีที่ 249.8 องศาฟาเรนไฮต์ (121 องศาเซลเซียส)
- ปล่อยให้ส่วนผสมวุ้นเย็นลงเล็กน้อย เทลงในจานหรือหลอด ปล่อยให้แข็งตัว
- เปลี่ยนฝาและเก็บในที่เย็น มืด และปลอดเชื้อ เช่น ตู้เย็น เก็บ จานวุ้น (จานเพาะเชื้อ) คว่ำเพื่อป้องกันไม่ให้เกิดการควบแน่นบนตัวกลาง
ค่า pH สุดท้ายของอาหารเลี้ยงเชื้อที่เตรียมไว้ควรเป็น 6.8 สื่อควรเป็นสีเหลืองอำพันอ่อนและมีความคงตัวของเจลาตินที่แน่น อาหารวุ้นที่เป็นสารอาหารที่เตรียมไว้ควรอยู่ในตู้เย็นได้นานถึงสองปี เว้นแต่จะมีการเปลี่ยนแปลงลักษณะที่ปรากฏของตัวกลางซึ่งจะบ่งบอกถึงการปนเปื้อน