แบคทีเรียเติบโตในจานเพาะเชื้อบนอาหารแข็งที่รู้จักกันในชื่อ วุ้นจากแบคทีเรีย ซึ่งเป็นที่ที่ยกขึ้นเป็นกลุ่มก้อนกลม ต่างจากเซลล์แบคทีเรียแต่ละเซลล์ อาณานิคมคือกลุ่มของแบคทีเรียที่มีขนาดใหญ่พอที่จะมองเห็นได้ด้วยตาเปล่า การเจริญเติบโตของแบคทีเรียสามารถวัดได้จากการสังเกตอย่างง่าย ๆ ว่ามีอาณานิคมอยู่กี่แห่ง อย่างไรก็ตาม วิธีการเชิงปริมาณที่มากกว่านั้นรวมถึงการใช้ห้องนับจำนวน หรือบ่อยครั้งกว่านั้น การนับจานที่ทำงานได้ มีการใช้บ่อยที่สุดเนื่องจากให้ข้อมูลเชิงคุณภาพ เช่น ผลกระทบของสภาวะการเติบโตที่แตกต่างกัน เนื่องจากอาจมีแบคทีเรียหลายพันล้านตัวในจานเพาะเชื้อ การวัดค่าก่อนอื่นจึงต้องเจือจางตัวอย่างเพื่อให้สามารถนับจำนวนโคโลนีได้
ในหลอดทดลอง ให้เติม 10 ไมโครลิตรของการเพาะเชื้อเริ่มต้นให้กับตัวกลางเจือจาง 90 ไมโครลิตร ปิดฝาหลอดให้แน่นแล้วหมุนวนเบา ๆ เพื่อให้ได้ส่วนผสมที่เป็นเนื้อเดียวกัน ตอนนี้ตัวอย่างมีความเข้มข้นหนึ่งในสิบของความเข้มข้นเดิม
ถ่ายโอนตัวอย่างใหม่นี้ 10 ไมโครลิตรไปยังหลอดทดลองใหม่ที่มีสารเจือจาง 90 ไมโครลิตร ผสมอีกครั้ง อีกครั้ง ผลลัพธ์จะเป็นตัวอย่างที่เจือจางเพิ่มเติม - ตอนนี้จะมีความเข้มข้นหนึ่งในร้อยของความเข้มข้นเดิม ทำซ้ำหลายๆ ครั้ง จนกว่าตัวอย่างเดิมจะเจือจางระหว่าง 10
4 และ 1010 ครั้ง ตรวจสอบให้แน่ใจว่าแต่ละหลอดติดฉลากด้วยการเจือจางที่ถูกต้อง เช่น 10-1, 10-2 และอื่นๆจ่าย 10 ไมโครลิตรของการเจือจางครั้งสุดท้ายที่ทำเสร็จแล้วลงบนจานวุ้น ใช้ขอบที่กางออก กระจายสารละลายแบคทีเรียให้ทั่วพื้นผิวของจานวุ้น ทำซ้ำอีกสองจาน เป็นเรื่องปกติที่จะดำเนินการตามขั้นตอนเหล่านี้กับระดับการเจือจางอื่นๆ เพื่อเปรียบเทียบ อย่าลืมติดฉลากที่ด้านล่างของจาน ปิดฝาในแต่ละจานและปล่อยให้จานวุ้นแห้งเป็นเวลาหลายนาทีไม่ว่าจะบนม้านั่งในห้องปฏิบัติการใต้เปลวไฟหรือในตู้ฟักไข่ วางจานในตู้ฟักซึ่งควรตั้งอุณหภูมิให้เหมาะสมกับสายพันธุ์ของแบคทีเรีย ปล่อยให้เติบโตเป็นเวลา 12 ถึง 16 ชั่วโมง
ควรมองเห็นอาณานิคมหลังจาก 16 ชั่วโมง อย่างไรก็ตาม การดัดแปลงพันธุกรรมบางอย่างอาจใช้เวลานานกว่านั้น (เช่น การพัฒนาสี) เมื่อสังเกตดูอาณานิคมได้ ให้นำแผ่นเปลือกโลกออกและหาจานที่มีระหว่าง 30 ถึง 300 อาณานิคม ใช้ปากกามาร์คเกอร์ถาวร วางจุดที่ด้านล่างของจานเพาะเชื้อ - ด้านที่มีวุ้น ไม่ใช่ที่ฝา - ทุกที่ที่มองเห็นอาณานิคมผ่านวุ้น นับแต่ละจุดของเครื่องหมาย ทำซ้ำสำหรับแต่ละจาน
ในการวัดปริมาณแบคทีเรียในการเพาะเลี้ยงเริ่มต้นสำหรับการทดลองนี้ จะต้องย้อนกลับการเจือจางในการคำนวณในสองที่ อย่างแรก เมื่อคุณเอาหนึ่งไมโครลิตรจากหลอดทดลองใส่ในจานเพาะเชื้อ คุณเอาตัวอย่างที่เจือจางไปแล้วหนึ่งในสิบ ดังนั้นคุณต้องคูณทุกอย่างด้วย 10 เพื่อย้อนกลับ นอกจากนี้ หากปัจจัยการเจือจางในหลอดทดลองคือ 10-7จากนั้นจำนวนอาณานิคมจะต้องคูณด้วย107 เพื่อที่จะย้อนกลับผลการเจือจาง เพียงลบเครื่องหมายลบออกจากเลขชี้กำลังในการคำนวณ ใช้สูตร:
[จำนวนโคโลนีที่นับ] × 10 × [ต้องคูณตัวอย่างกี่ครั้งเพื่อให้ได้ความเข้มข้นดั้งเดิม: ตัวอย่างเช่น 105] = จำนวนหน่วยสร้างอาณานิคม (CFU) ต่อมิลลิลิตรของวัฒนธรรมเริ่มต้น นี่คือการเติบโตของแบคทีเรียในจานเพาะเชื้อของคุณ
